24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2224  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】RP-HPLC分离蛋白质样品遇到的奇怪现象 已有5人参与

本人最近在做RP-HPLC分离蛋白质
柱子:C8 孔径 300 A
A液: 98% 水     2% 乙腈 0.1% TFA
B液: 90% 乙腈  10%水   0.1% TFA
样本均为蛋白质复杂样本,每个组分大概包括50-100个左右的蛋白,只是分力量不同(楼下有图)
A-B: <20KD
C-H: 20-150 KD (c-h 分子量逐渐增大)
A-B图分离效果还可以接受,但是C-H分离效果很差,不知道原因,请高手指点。
另外,我考虑可能是蛋白质分离比较大 300 A的孔径可能不合适,但是我改用1000A的柱子效果也差不多是这样。请有相关方面经验的高手指教。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 皖山潜凤 at 2010-08-13 14:32:11:




不过说的对, 对于大分子还是用280好, 214主要是针对小肽的。

呵呵,谢谢。我问了一下ABI的技术支持,他认为跟分子量分离效果相关的因素除了Pore size 之外,还跟固定相的C含量有关,他建议用下C4试试,好比C18不能分离蛋白一样的道理。280我用了,尽管信号很低,但是分离效果还是不好。214针对 peptide bond,比280灵敏,尤其当样品量比较低的生活,280可能没有214效果好。不过,很感谢你热心的回答。
10楼2010-08-13 15:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

sqhnsd

金虫 (正式写手)

2楼2010-08-09 09:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-09 10:32:34:
检测波长

214 nm
4楼2010-08-09 13:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

sqhnsd(金币+1): 2010-08-09 14:58:45
214nm干扰太大了,基线不稳是肯定的,飘的没法看
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
5楼2010-08-09 14:05:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +7 JKSOIID 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:10 by 滴滴上岸呀
[考研] 327求调剂 +5 小卡不卡. 2026-03-29 5/250 2026-03-30 19:30 by Wang200018
[考研] 化工专硕求调剂 +5 question挽风 2026-03-24 5/250 2026-03-30 18:34 by tianyyysss
[考研] 材料化工340求调剂 +3 jhx777 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:54 by JourneyLucky
[考研] 286求调剂 +5 Faune 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:15 by 无际的草原
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +10 Nadiums 2026-03-25 11/550 2026-03-30 11:56 by yjolah
[考研] 求调剂 +10 张zz111 2026-03-27 11/550 2026-03-30 09:17 by 无际的草原
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
信息提示
请填处理意见