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2008102037

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】沉默载体连接 已有4人参与

求助各位达人:

在构建沉默载体的时候,要将反向重复臂的两个片段A和B及内含子酶切下来连到表达载体上,但现在怎么都连不上,不知道问题出在哪里,所用的酶是BamHI和KpnI,所用的两个载体是没有问题的,已做出来过。但现在却不行了,想问问各位可碰到过类似情况?怎么解决的?
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 好久不见你了 2010-08-07 00:15:18
切下来的片段再连回原来的载体看看能不能连上
看看是不是粘末端的问题
3楼2010-08-06 20:32:49
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-07 10:50:01:




RNAi 怎么涉及到了内含子

沉默载体正、反向臂之间插入一段无关序列(异源内含子为佳)有利于dsRNA的形成,提高沉默效率
7楼2010-08-07 11:18:52
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