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【求助/交流】FITC与短肽的连接问题,直接混合
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[交流]
【求助/交流】FITC与短肽的连接问题,直接混合
已有7人参与
我看到文献中关于FITC与短肽的连接是通过直接混合实现的
是不是FITC可以与短肽中的氨基反应,或者其它原因
反应短肽的氨基与FITC的摩尔比或短肽与FITC的质量比如何设定呢
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1楼
2010-08-03 12:09:33
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Originally posted by
hsiaohu
at 2010-08-03 23:05:32:
FITC的异硫氰基很容易与蛋白质的氨基反应,搅一搅就可以,透析纯化。
FITC被葡聚糖修饰后,异硫氰基不消失吧,有多少个这样的基团
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6楼
2010-08-04 08:42:16
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luwowo
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★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):新虫,鼓励下,欢迎常来~~ 2010-08-03 21:14:46
蜗牛VS蜗牛(金币+3): 2010-08-04 08:41:07
我没做过短肽,但是我曾经做过FITC标记胶原蛋白,的确相互混合就能反应,没什么特异性。一般染料会过量,所以可能事后处理会比较麻烦,一定要把单体透析干净,而且不保证不会有单体残留。
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2楼
2010-08-03 12:43:17
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引用回帖:
Originally posted by
luwowo
at 2010-08-03 12:43:17:
我没做过短肽,但是我曾经做过FITC标记胶原蛋白,的确相互混合就能反应,没什么特异性。一般染料会过量,所以可能事后处理会比较麻烦,一定要把单体透析干净,而且不保证不会有单体残留。
即使透析,也要大体确定可能的结合比例
不然浪费是不科学的
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3楼
2010-08-03 20:55:52
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而且我用的FITC是用高分子物质修饰的,穿不透细胞膜
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4楼
2010-08-03 20:56:19
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