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幸运随我99

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】酵母菌破壁已有11人参与

这几天在破酵母菌的细胞壁,想从里面提取蛋白,一直不理想,染色发现没有条带,恳请热心的虫友指点!感激不尽
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幸运随我99

铜虫 (初入文坛)

用了超声破菌,超5s.停5s,总共超了3个小时,跑page后没有条带;还用了异丙醇溶解,头一回溶了8个小时左右,跑page只出现了2条带,这次用异丙醇溶了2小时,跑page后没有条带,好郁闷哦!煮沸,冷冻重复3次也没有蛋白条带。
3楼2010-08-02 14:47:34
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看天

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的破壁  过程 具体如如何
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
2楼2010-08-01 19:30:44
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henkally

禁虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-02 17:10:36
本帖内容被屏蔽

4楼2010-08-02 15:10:37
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xiangquanju

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励交流 2010-08-02 17:30:35
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-08-02 15:10:37:
建议用玻璃珠破碎法(玻璃珠SIGMA有卖,具体步骤百度一下就知道了).
酵母细胞壁很厚,超声破碎效果很差的.我们实验室一直都用玻璃珠

恩,很多文献都是用的玻璃珠破壁,但是破壁的时候要保持低温,因为玻璃珠很热,会导师蛋白降解,可惜我们实验室都是用涡旋仪涡旋的,每次在那里破壁都要用很久的时间,请问你们是用什么涡旋的呢?
5楼2010-08-02 16:34:27
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