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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】假丝酵母的破碎条件
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】假丝酵母的破碎条件 已有4人参与

问一下，我的假丝酵母以300w，破1s，间歇2s超声破碎。工作时间为30min，离心后上清和沉淀都没有活力，请问大家都以什么条件超声破碎的？
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1楼 2010-08-01 12:13:56
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看天

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 炒饭大王 at 2010-08-01 12:13:56:
问一下，我的假丝酵母以300w，破1s，间歇2s超声破碎。工作时间为30min，离心后上清和沉淀都没有活力，请问大家都以什么条件超声破碎的？

我们以前酵母破壁 也是和你这样差不多的 但是时间比你的还少 好像只有12min
前些天 也有人过来求关于酵母破碎的 好像都说我的破壁肯定不完全～～
这个酵母被破的怎么样 我也不清楚..
会不会是你的时间太长了 过量的热给酶失活了呢 你是放在冰里了吧

还有 测酶活 你们是先离心 在单破壁酵母细胞 还是连整个反应液一起破碎呢？
测酶活的话 反应液中的代谢物很有可能对测定产生干扰 不知你测的是什么酶？
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2010-08-01 13:21:06
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1s:2S间歇是不是太短了，10s：10s间歇看看。
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Thank-you，so-blue.
3楼2010-08-01 15:29:41
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2010-08-01 13:21:06:

我们以前酵母破壁 也是和你这样差不多的 但是时间比你的还少 好像只有12min
前些天 也有人过来求关于酵母破碎的 好像都说我的破壁肯定不完全～～
这个酵母被破的怎么样 我也不清楚..
会不会是你的时间太长了 ...

我是破后离心10000rpm10min，再15000rpm10min，然后取上清反应后，打气相测的，测的是氧化还原酶
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4楼2010-08-03 16:31:32
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yaolinlshang

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
哦，我做假丝酵母用超声波破碎也没有酶活。我用的是3s：3s，机器的最大共率。用其他细胞破碎方法呢？
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最是人间留不住，朱颜辞镜花辞树！
5楼2012-11-20 16:52:32
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