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zshanjiang

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】葡聚糖凝胶G-100再生 已有11人参与

请问葡聚糖凝胶G-100用几次后流速很慢,想再生一下,请问怎么再生?是在柱内再生还是在柱外再生?
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henghuibio

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
G-100 本身流速就较低
糜蛋白酶,胰蛋白酶,RNase A,DNase I,葡聚糖凝胶,琼脂糖凝胶,亲和色谱介质专业厂家
5楼2010-08-04 09:29:53
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liujiahui

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
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karl2100(金币+2):谢谢指教! 2010-08-05 19:40:47
首先,流速变慢的原因是什么呢?你为什么要再生它呢?

我觉得,流速变慢的原因可能有:
1. 正常范围内的变慢,可能是由于,加压使柱子密集了,所以变慢,不需理会。
2. 胶粒将出口堵了,这样只要倒出来重新装柱,就会好转。
3. 过柱时,压力太大,把柱子压塌了(就是把胶粒的孔状结构挤压碎了)。
不严重时,可以考虑,重新装柱,装柱时,先铺一层新胶,再填旧胶。如果非常严重,无法起到分离效果了,除了换胶别无他法。

所谓再生,我理解是指柱子被样品吸附,而无法原位洗脱,只能采用强碱、有机溶剂、加热等强硬的方法,将样品从胶上除下来,以起到胶再生的目的。理论上,再生应该根据你的样品的性质。但由于一般凝胶柱是用来分离蛋白质的,所以一般的书(网)上都介绍了用强碱将蛋白质除下来的方法。(楼主自己去查吧。)

[ Last edited by liujiahui on 2010-7-29 at 00:25 ]
3楼2010-07-29 00:23:06
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zshanjiang

木虫 (正式写手)

我就是不知道它变慢的原因,我刚开始装了两次,流速都很慢,请问这是什么原因?
4楼2010-07-29 16:11:34
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一生随袁

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼上说的对 G-100吸水较多 膨胀较强 凝胶颗粒之间的空隙比较小 故流速很低 是正常现象啊 楼主要有耐心啊
6楼2010-08-04 14:34:32
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