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蓝鲸_lanjing铁虫 (初入文坛)
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【求助/交流】茚三酮法测氨基酸含量,虫虫们，HELP! 已有12人参与
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看了一篇硕士论文的附录，说是游离氨基酸用茚三酮法来测。但是他的溶液配制我有点想不明白。请大家帮我看看这么做行不行。 （1）水合茚三酮试剂:取0.6g茚三酮置于烧杯中,加15mL正丙醇溶解,再加30 mL正丁醇,60mL乙二醇,最后加入9mL pH5.4,0.2mol/L的醋酸盐缓冲液。（这个液体总量是114ml，这是什么比例啊？) （2）标准亮氨酸：取亮氨酸46.8 mg,溶于10%异丙醇溶液中，并定容至100mL(10%异丙醇用pH5.4，0.2M醋酸盐缓冲液配制)。取5mL稀释液，再用pH5.4醋酸盐缓冲液定容到50mL，此即为含氮为5mg/L的标准液；(这个计算我不是太明白，怎么46.8mg溶于总量100ml的液体再稀释10倍就变成5mg/L的标准液了？应该是46.8mg/L啊。) （3）0.3%抗坏血酸溶液:取0.3g抗坏血酸溶于100mL蒸馏水中，现用现配。 标准曲线： 试剂管号 1 2 3 4 5 6 标准亮氨酸（mL） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 pH5.4缓冲液（mL） 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 水合茚三酮（mL） 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 0.3%抗坏血酸（mL） 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 每管含氮量（μg） 0 1 2 3 4 5 |
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lordsidious
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