应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酵母DNA进行pcr鉴定
52/1返回列表
查看: 1281  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yanglinhui

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酵母DNA进行pcr鉴定 已有10人参与

酵母DNA进行pcr鉴定，第一次pcr有一条暗带，但没回收，第二次再p的时候就p不出来了，第三次还是p不出来。。。条件都没变，只是模板浓度比第一次大了，不知怎么回事，请大家给点意见哦
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-07-22 16:13:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陆健

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-23 13:47:31
酵母PCR比较特殊，我们通常都是先抽提质粒DNA，然后以其为模板进行PCR，但是这里有三个比较大的影响因素，一是抽提的DNA中蛋白太多，其二是模板浓度问题，这两点为大家所共知，然而还有一个重要的因素被很多人忽略，就是RNA的影响，抽提的DNA需要用RNase处理一下，不然会干扰PCR反应。
赞一下 回复此楼
11楼2012-05-22 23:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-22 17:15:27
以基因组为模板PCR受模板影响较大，比如基因组提取的好坏，模板量的控制等等，我一般以基因组为模板做鉴定的时候，一律用TD-PCR，模板做梯度稀释，1/20,1/40,1/80,一般情况下都能成功。
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2010-07-22 16:43:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

steamsn

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):good! 2010-07-22 21:41:51
你拿你第一次的PCR产物稀释一下,做为模板在进行扩增,看看能扩增出来吗,如果扩增不出来就说明你的模板有问题.
赞一下(2人) 回复此楼
我命由我不由天
3楼2010-07-22 17:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):欢迎分享经验。 2010-07-22 21:42:24
PCR这个东西很怪异，有的时候模板浓度大了也会不出带的，只有浓度在适宜范围才会扩增成功，所以你可以试着稀释一下模板，进行扩增。另外按3楼说用PCR产物稀释了P，试试
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-07-22 21:23:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭