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aofeng860308木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】怎么样提高TA克隆的正向连接概率？ 已有7人参与
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| 最近在做一个TA克隆，经蓝白斑筛选后，得到白斑，经PCR鉴定，结果全为阴性！郁闷了，运气也实在太差了点，十几个菌落中都挑不出一个正向的！（PCR体系应该不会有问题，前几天刚做了另外一个重组的鉴定！）怎么样才能提高TA克隆的正向连接效率呢？做过的大虾们请指点一下！ |
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aofeng860308
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2楼2010-07-19 09:07:31
aofeng860308
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3楼2010-07-19 09:18:47
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3):good！ 2010-07-19 20:10:15
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也就是说纯克隆，不表达？ 传统TA克隆是没办法定向的啵 我查到有个定向法，不过也是要经过酶切去掉反向重组质粒 http://www.ebiotrade.com/newsf/2010-5/2010521173606846.htm 或者你考虑Invitrogen的TOPO定向克隆系统吧~~不够我没用过，但据说效果一流 http://zh.invitrogen.com/site/cn ... l-TOPO-cloning.html |
4楼2010-07-19 09:39:35