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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于抗体亚类
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weiqiqq

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于抗体亚类 已有4人参与

请教各位，我做的都是小分子藻毒素的单克隆抗体，筛出的是IgM，同一实验室的情况跟我一样，筛出的也是IgM，不知道是什么原因筛不出IgG，是跟免疫有关吗，各位有什么好的建议可以使产生的抗体是IgG?
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1楼 2010-07-15 09:50:11
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烟大考研

金虫 (正式写手)
weiqiqq(金币+1): 2010-07-16 12:02:40
我们公司正在委托一家实验室做单抗，就大概学习了一下，楼主这个可能与免疫有关，我看到过相关报道，说初次免疫应答得到的杂交瘤分泌的主要是IgM，再次免疫应答得到的杂交瘤分泌的主要是IgG，
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
6楼2010-07-16 09:27:38
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-15 11:03:46
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-15 12:57:30
引用回帖:
Originally posted by weiqiqq at 2010-07-15 09:50:11:
请教各位，我做的都是小分子藻毒素的单克隆抗体，筛出的是IgM，同一实验室的情况跟我一样，筛出的也是IgM，不知道是什么原因筛不出IgG，是跟免疫有关吗，各位有什么好的建议可以使产生的抗体是IgG?

信息量不够无法告诉你为什么没有igg，不知道你用什么方法验证你的抗体亚型的？如果方便可以简单的描述下实验过程？另外你提到别人也如此，人家的抗原和你的一样么？
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52187644
2楼2010-07-15 10:50:17
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weiqiqq

木虫 (小有名气)
是用抗体亚类鉴定试剂盒鉴定的，实验过程没什么特别之处，就是常规的免疫，细胞融合，3次亚克隆筛选，同学的抗原是另外的一种藻毒素，都属于小分子藻毒素
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-07-15 10:50:17:



信息量不够无法告诉你为什么没有igg，不知道你用什么方法验证你的抗体亚型的？如果方便可以简单的描述下实验过程？另外你提到别人也如此，人家的抗原和你的一样么？

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3楼2010-07-15 21:55:23
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★
scelab(金币+1)::tiger18:难得看见您过来解答问题。。。:tiger18: 2010-07-16 18:04:00
引用回帖:
Originally posted by weiqiqq at 2010-07-15 21:55:23:
是用抗体亚类鉴定试剂盒鉴定的，实验过程没什么特别之处，就是常规的免疫，细胞融合，3次亚克隆筛选，同学的抗原是另外的一种藻毒素，都属于小分子藻毒素

常规免疫？皮下，皮内，还是粘膜？
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
4楼2010-07-16 07:53:49
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
你的抗原免疫了几次？免疫周期如何？抗原是个什么情况，直接免疫还是偶联了载体？抗原每次免疫时候是否都是新鲜，即同一批做好免疫还是每次免疫之前制备？筛选方法？筛选时使用的二抗是什么？
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52187644
5楼2010-07-16 09:24:28
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weiqiqq

木虫 (小有名气)
是腹腔和皮下联合多点注射
引用回帖:
Originally posted by houjinglhy at 2010-07-16 07:53:49:

常规免疫？皮下，皮内，还是粘膜？

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7楼2010-07-16 12:02:25
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weiqiqq

木虫 (小有名气)
一共免疫了3次，首免后间隔2周二免，再间隔2周三免，三免后7天测效价，强免三天后融合
抗原是偶联以后免疫的
抗原是同一批，做好分装-20保存
用有限稀释法筛选，二抗是羊抗鼠IgG
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-07-16 09:24:28:
你的抗原免疫了几次？免疫周期如何？抗原是个什么情况，直接免疫还是偶联了载体？抗原每次免疫时候是否都是新鲜，即同一批做好免疫还是每次免疫之前制备？筛选方法？筛选时使用的二抗是什么？

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8楼2010-07-16 12:10:43
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
scelab(金币+3):谢谢交流 2010-07-16 18:04:20
可能免疫周期短了容易产生IGM。
使用羊抗鼠的二抗产生IGM也是可能的。
某些抗原比较容易刺激机体产生IGM也是有可能的。
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52187644
9楼2010-07-16 15:56:38
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微小瓜虫

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
521102楼: Originally posted by weiqiqq at 2010-07-16 12:10:43:
一共免疫了3次，首免后间隔2周二免，再间隔2周三免，三免后7天测效价，强免三天后融合
抗原是偶联以后免疫的
抗原是同一批，做好分装-20保存
用有限稀释法筛选，二抗是羊抗鼠IgG

这，如果你得到的是IgM，为什么二抗用IgG还能筛的出来呢……好疑惑
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10楼2012-03-27 10:37:10
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