应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC分离求助
51/1返回列表
查看: 1646  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

slightshiner

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC分离求助 已有6人参与

本人正在分离几个氨基酸衍生物，遇到大麻烦了，看能不能在这获得有价值的信息。
1. 化合物描述：一个小分子的pyrrolinzine和一个氨基酸结合，分子量250，最大吸收在220nm，推测有四个异构体（小量分析图谱可看到有三四个峰）；
2.性质描述：对酸不稳定，易分解；
3. 尝试过的条件：用C18柱(Prodigy, Luna, from Phenomenex Company),流动相用的是乙氰/水，梯度洗脱，45分钟内ACN从2%到8%。在这种情况下，偶尔可得到好的图谱，看到有3/4个不同于原料的峰，重复性差。但如果加大上样量，整个图谱变得稀奇古怪，峰强并不随上样量增加而升高，每个峰都变宽，强度没有升多少，本来几个峰retention time就差不多，这样根本峰不开了。
4.试过缓冲剂体系，乙酸铵不行，溶剂在220吸收，这样连个好的基线都得不到；50 mM磷酸盐体系也试过，重复性差；没试过甲酸铵体系，不知他的cut-off波长多少；pH值当然都是在中性偏碱。

希望大家能多给建议。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-11 22:22:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)
slightshiner(金币+1):化合物是我自己合成的，现在需要分离。酸性条件下我的化合物不稳定。我们用的WATERSHPLC，三部，全是。醋酸铵的CUTOFF波长太长，不适合我化合物的分离。我的只能在220检测。 2010-07-12 11:28:07
引用回帖:
Originally posted by slightshiner at 2010-07-11 22:22:31:
本人正在分离几个氨基酸衍生物，遇到大麻烦了，看能不能在这获得有价值的信息。
1. 化合物描述：一个小分子的pyrrolinzine和一个氨基酸结合，分子量250，最大吸收在220nm，推测有四个异构体（小量分析图谱可看到 ...

不晓得楼主是自己进行衍生化操作后上HPLC呢，还是检测别人衍生化以后的样品呢？ 还有就是菲罗门的C18柱子是可以分开氨基酸衍生物的，用的是醋酸铵缓冲体系，pH值要调到6左右，另外切忌缓冲盐浓度不要过高，否则会堵，安捷伦的hplc系统还好，要是waters的系统就一定要注意缓冲盐的浓度。
赞一下 回复此楼
6楼2010-07-12 09:08:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

hyw166_07

slightshiner(金币+1):thanks for your suggestion 2010-07-12 10:24:37
引用回帖:
Originally posted by slightshiner at 2010-07-11 22:22:31:
本人正在分离几个氨基酸衍生物，遇到大麻烦了，看能不能在这获得有价值的信息。
1. 化合物描述：一个小分子的pyrrolinzine和一个氨基酸结合，分子量250，最大吸收在220nm，推测有四个异构体（小量分析图谱可看到 ...

建议朋友，可以到分析 测试百科网去问问，友情帮顶。。
赞一下 回复此楼
2楼2010-07-11 22:31:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhsteel

金虫 (小有名气)
slightshiner(金币+1):估计C4更够呛。甲醇和我的化合物反应。不稳定可能是由于有机相梯度变化太小。 2010-07-12 10:26:37
换C4柱子怎么样:  或者换甲醇? 不知道楼主的图谱为什么不稳定.  没有稳定的数据该如何调整呢?
赞一下 回复此楼
只要方便虫子们就好，怎么帮助是次要的吧
3楼2010-07-12 05:43:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

80年后

金虫 (正式写手)
slightshiner(金币+1):氨有可能与原料反应，会使图谱更复杂。 2010-07-12 10:27:56
乙酸胺是偏中性的 甲酸胺缓冲盐都是偏酸的 用过氨水溶液吗
赞一下 回复此楼
4楼2010-07-12 06:34:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +10 Kittylucky 2026-08-27 10/500 2026-08-28 07:10 by sincosx
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 05:13 by winsaint
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 3/150 2026-08-28 00:49 by 3RAFyYXYSwGS
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭