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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】血清中蛋白质多少转离心才能使其沉淀?
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】血清中蛋白质多少转离心才能使其沉淀? 已有7人参与

血清中蛋白质多少转或g离心才能使其沉淀?5000rmp或10000rmp可以吗？
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1楼 2010-07-06 20:17:45
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-07 08:15:36
不知道你说的是血清中的什么蛋白，有些蛋白比较大融合聚合的比如说纤维蛋白倒是可以离心出来，但是其他如IgG类型的10000rpm是不行的，那分子量更小的就更加不行了哦。
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52187644
2楼2010-07-06 22:50:04
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
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如二楼所说，不知道你想离下来的是什么成份，有些蛋白是根本就离不下来的
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3楼2010-07-07 00:02:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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超速离心都做不到
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4楼2010-07-07 09:08:37
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~· 2010-07-07 14:17:08
血清中的蛋白不清楚，但是我平常利用大肠杆菌表达的蛋白40000g是离不下来的。正如楼上所说，一些蛋白在超速离心都离不下来。
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5楼2010-07-07 12:48:19
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-07-06 22:50:04:
不知道你说的是血清中的什么蛋白，有些蛋白比较大融合聚合的比如说纤维蛋白倒是可以离心出来，但是其他如IgG类型的10000rpm是不行的，那分子量更小的就更加不行了哦。

比如说碱性磷酸酶和骨钙素多少转时能离心沉淀?
我是不希望离下来的,因为要用ELISA法测血清中的的以上蛋白.
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6楼2010-07-07 19:42:46
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
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不会离心下来的。
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52187644
7楼2010-07-08 09:02:05
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
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先用饱和硫酸铵沉淀一下，然后12000离心大部分的蛋白能离下来，用生理盐水溶解后，要把硫酸铵透析掉
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
8楼2010-07-08 10:08:54
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jqq1985

银虫 (正式写手)
硫酸铵沉淀，8000rpm离心，用适当缓冲溶解。
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9楼2010-07-09 10:48:52
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