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wangjun411

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】荧光读数变化很大的原因（紧急）已有3人参与

请教各位大虾，荧光测定时同一个样品读数的变化都比较大，是为什么呢？是仪器灵敏度高了还是溶液中荧光物质的影响呢？
另外，我们采用衍生化法进行测定，但是空白样的值比对照品的都要高，而且随浓度的增加荧光强度变小，是因为浓度高了荧光自熄灭的关系吗？但是我们的浓度都已经调得很低了，已经到ug/ml，还需要调低吗？
很急啊，麻烦大家了！

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1楼 2010-07-03 19:14:07

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关宏亮

至尊木虫 (正式写手)

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★
opq691(金币+1):奖励，谢谢交流 2010-07-03 20:46:32
wangjun411(金币+1):谢谢！ 2010-07-04 12:31:34

引用回帖:

Originally posted by wangjun411 at 2010-07-03 19:14:07:
请教各位大虾，荧光测定时同一个样品读数的变化都比较大，是为什么呢？是仪器灵敏度高了还是溶液中荧光物质的影响呢？
另外，我们采用衍生化法进行测定，但是空白样的值比对照品的都要高，而且随浓度的增加荧光强 ...

这是一个很复杂的问题，一般不可能是仪器的问题的，主要是溶液中荧光物质的影响。衍生后是否需要分离？衍生的效果如何？如果不分离的话，非荧光物质是否对衍生物有影响呢？还有就是荧光衍生物之间的自猝灭现象，其实这个在稀溶液条件下，可以忽略的。