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koalarola

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光酶标仪测定脂肪酶与底物反应后的吸光值,为什么各波长均没有变化?(附结果图)

大家好,请帮我看看我用荧光酶标仪测出的脂肪酶与底物反应的吸光值,我的中性脂肪酶测定波长分别为328、470nm,酸性脂肪酶测定波长分别为350、445nm。我的数据到底是设置波长出问题还是怎么回事?我用的是NUNC的96孔F-板,黑色的。测不出吸光值,十分着急
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  • 2012-12-23 15:33:03, 131.63 K

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koalarola

新虫 (小有名气)

koalarola: 回帖置顶 2013-01-10 17:30:42
结果出来了,我没有设置激发波长和发射波长。乌龙啊,自学使用荧光酶标仪还是吃了很多亏的,希望以后有荧光酶标仪的教程资源可以上传给大家。
8楼2013-01-10 17:30:17
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普通回帖

11jxli1

禁虫 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流 2012-12-23 17:37:54
本帖内容被屏蔽

2楼2012-12-23 16:54:51
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koalarola

新虫 (小有名气)

经过11jxli1虫友的指点,附图。
最后一张是设置的波长数据,我用的是经典3mL反应体系0.1mL底物,0.1mL酶液加入到2.8mL缓冲液中迅速混匀,37℃下保温30min,终止反应后取200微升到酶标板上,得到的是图中的数据。并且,D排的7-12号和H排的9-12号均为加液体。

445nm.png



350nm.png



328nm.png



470nm.png



相关数据.png

3楼2012-12-23 17:19:41
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koalarola

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 11jxli1 at 2012-12-23 16:54:51
你直接发图偏上来看一下
用荧光酶标仪测出的脂肪酶与底物反应的吸光值,我的中性脂肪酶测定波长分别为328、470nm,酸性脂肪酶测定波长分别为350、445nm。

谢谢指点,已附图。
4楼2012-12-23 17:20:34
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koalarola

新虫 (小有名气)

以下是我参考测脂肪酶活的方法,附图

参考方法.png

5楼2012-12-23 17:55:23
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jjp66546626

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
koalarola: 金币+1, 有帮助, 谢谢参与。有没有其他可能?因为我取样200微升到酶标板上时,D排的7-12号孔和H排的9-12号孔均没有加样,但得到结果与其他板孔数据一样。 2012-12-24 13:32:16
貌似荧光过强  建议对所取200μl溶液进行稀释

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2012-12-23 18:09:11
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koalarola

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jjp66546626 at 2012-12-23 18:09:11
貌似荧光过强  建议对所取200μl溶液进行稀释

您好,谢谢您的回复。还有没有其他可能?因为我取样200微升到酶标板上时,D排的7-12号孔和H排的9-12号孔均没有加样。而其吸光值跟加样的吸光值接近甚至一样。
7楼2012-12-23 18:52:48
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幽幽小草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by koalarola at 2013-01-10 17:30:17
结果出来了,我没有设置激发波长和发射波长。乌龙啊,自学使用荧光酶标仪还是吃了很多亏的,希望以后有荧光酶标仪的教程资源可以上传给大家。

请问激发坡长跟发射波长怎样用酶标仪进行测定呢?,我是要测荧光性
9楼2016-03-25 16:11:09
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许加龙莒县

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by koalarola at 2013-01-10 17:30:17
结果出来了,我没有设置激发波长和发射波长。乌龙啊,自学使用荧光酶标仪还是吃了很多亏的,希望以后有荧光酶标仪的教程资源可以上传给大家。

可以请教一下不,电话17512577505
人生苦短,修炼一生。
10楼2020-11-11 20:54:05
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