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wangjun411

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】荧光读数变化很大的原因(紧急) 已有3人参与

请教各位大虾,荧光测定时同一个样品读数的变化都比较大,是为什么呢?是仪器灵敏度高了还是溶液中荧光物质的影响呢?
另外,我们采用衍生化法进行测定,但是空白样的值比对照品的都要高,而且随浓度的增加荧光强度变小,是因为浓度高了荧光自熄灭的关系吗?但是我们的浓度都已经调得很低了,已经到ug/ml,还需要调低吗?
很急啊,麻烦大家了!
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wyx1985

至尊木虫 (著名写手)

我也遇到了这个问题,想问下楼主你的激发夹缝和发射夹缝设置的是多少?
5楼2010-09-21 21:14:36
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关宏亮

至尊木虫 (正式写手)


opq691(金币+1):奖励,谢谢交流 2010-07-03 20:46:32
wangjun411(金币+1):谢谢! 2010-07-04 12:31:34
引用回帖:
Originally posted by wangjun411 at 2010-07-03 19:14:07:
请教各位大虾,荧光测定时同一个样品读数的变化都比较大,是为什么呢?是仪器灵敏度高了还是溶液中荧光物质的影响呢?
另外,我们采用衍生化法进行测定,但是空白样的值比对照品的都要高,而且随浓度的增加荧光强 ...

这是一个很复杂的问题,一般不可能是仪器的问题的,主要是溶液中荧光物质的影响。衍生后是否需要分离?衍生的效果如何?如果不分离的话,非荧光物质是否对衍生物有影响呢?还有就是荧光衍生物之间的自猝灭现象,其实这个在稀溶液条件下,可以忽略的。
2楼2010-07-03 19:31:15
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nanali

木虫 (小有名气)

如果是同一个样品有可能是温度变化的原因
3楼2010-07-04 22:28:40
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wangjun411

木虫 (小有名气)

就一个样品放在仪器里连续读数,读数都在不停的变化,没有规律。奇怪啊!
4楼2010-07-05 22:41:06
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