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肥猫:福星

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】液相色谱-流动注射联用时,走基线时成脉冲式的曲线,原因是什么呢? 已有4人参与

我是做液相色谱-化学发光技术联用的,因在走基线时,怎么会出现脉冲式(如附图所示)的基线呢?已知流动相就是甲醇和水,发光体系中有1M的硝酸+Ce(IV)作氧化剂,另加发光体,我感觉发光体系这边对流动相应该不会有什么问题的影响,开始我认为是PMT中盘管没有固定好,形成的脉冲,但我把盘管重新固定了来走基线,依旧是脉冲式的,二者的流速不同会不会影响形成脉冲式的基线呢?(高压泵流速:0.8mL/min;恒流泵流速:1.1mL/min左右)。说明一下:色谱柱我已充分冲洗了两个小时,柱压是衡定的。


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HPLC-CL联用技术;编辑;磁性纳米材料吸附蛋白/多肽
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forging

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是那里进气泡了?
2楼2010-06-30 16:35:42
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肥猫:福星

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by forging at 2010-06-30 16:35:42:
是不是那里进气泡了?

我也把管路中的气泡都弹出去了的,假如一时的气泡,也不会形成象脉冲式的呀。但原因是从谱图来看,似乎有一定的周期呀
HPLC-CL联用技术;编辑;磁性纳米材料吸附蛋白/多肽
3楼2010-06-30 17:09:54
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mikeliubao

金虫 (小有名气)


pplover(金币+1):感谢参与! 2010-07-01 11:33:16
看你的脉冲间隔时间比较恒定,你的横流泵是不是用你说的流动注射泵?还是用的是注射泵?
国产的流动注射泵还是有脉冲的,算一下这个时间与你的信号时间间隔是不是一样。

另外也要注意,如果没有在线脱气机(LC)或者没有背压阀,甲醇水体系还是容易产生少量气泡的,尤其是在发光体系下,信号很灵敏,一点波动就会被放大。
4楼2010-06-30 17:27:40
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肥猫:福星

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by mikeliubao at 2010-06-30 17:27:40:
看你的脉冲间隔时间比较恒定,你的横流泵是不是用你说的流动注射泵?还是用的是注射泵?
国产的流动注射泵还是有脉冲的,算一下这个时间与你的信号时间间隔是不是一样。

另外也要注意,如果没有在线脱气机(L ...

谢谢!这也是我正想的,但不晓得怎么去消除,再者就是原来用乙腈和水作为流动相,以及用甲醇和盐作为流动相时,用相同的发光体系测定其它物质走基线时没有出现这种情况的。用超声脱气固然效果不好,但这限于实验室条件有限。若没有用与发光联用,光是液相色谱这边,走的基线半个小时就走平了的。

恒流泵流速产生的脉冲,又该怎么消除呢?望不吝赐教!谢谢!因为前面不得师兄师姐带,很多东西自己摸索比较困难。
HPLC-CL联用技术;编辑;磁性纳米材料吸附蛋白/多肽
5楼2010-07-01 08:43:45
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zhangmin87

新虫 (初入文坛)


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6楼2010-07-01 15:49:59
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mikeliubao

金虫 (小有名气)


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你可以尝试确认是否是恒流泵带来的波动。

比如直接用恒流泵注入发光物质,看看是否有相同的脉冲,如果有就只追恒流泵的原因。

至于恒流泵脉冲如何消除,这个不好解决,固有的。
尝试注射泵或者干脆重新那个液相的泵作为一个衍生泵使用。
7楼2010-07-02 11:58:29
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肥猫:福星

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by mikeliubao at 2010-07-02 11:58:29:
你可以尝试确认是否是恒流泵带来的波动。

比如直接用恒流泵注入发光物质,看看是否有相同的脉冲,如果有就只追恒流泵的原因。

至于恒流泵脉冲如何消除,这个不好解决,固有的。
尝试注射泵或者干脆重新那个 ...

谢谢!
我已经尝试只用恒流泵做发光,得到的基线是非常平稳的,看来不是恒流泵的问题,我现在再就对色谱这边看一下流动相的问题,最后再来看是不是柱子的问题的啦。
HPLC-CL联用技术;编辑;磁性纳米材料吸附蛋白/多肽
8楼2010-07-02 17:00:50
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