| 查看: 2031 | 回复: 4 | |||
jinling158铜虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】相对定量可以不做标准曲线吗 已有3人参与
|
|
本人想做real time PCR, 做测试菌株和参照菌株之间A基因的表达差异，看了很多资料之后，觉得没有必要做标准曲线，原因如下： 目前主要用两种方法进行相对定量，其中之一是2－△△Ct法，该法前提是目的基因和参照基因有相同的扩增效率且接近100%；我认为用这种方法需要做标准曲线来看一下目的基因和参照基因的扩增效率是否相同。 另外一种方法是Pfaffl法，这种方法应用的前提是单个基因（目的基因和参照基因）在试验样本和标准样本中有相同的扩增效率，但不要求目的基因和参照基因有相同的扩增效率。但是用这种方法要知道目的基因和参照基因的扩增效率，请问一下做过的同学，如果不做标准曲线的话怎么知道目的基因和参照基因的扩增效率呢？另外，怎么确定单个基因在不同样本之间具有相同的扩增效率呢？ 希望做过的童鞋发表一下您的高见，谢谢！ [ Last edited by jinling158 on 2010-7-2 at 17:37 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有90人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 色谱新手求助，外标法测定标准曲线取绝对面积为纵坐标，如果出现平头峰可以吗？
已经有41人回复
- 不解的问题，q-PCR结果分析。
已经有6人回复
- 关于色谱定量分析时的标准曲线
已经有12人回复
- 实时定量PCR,一定要做标准曲线么?有什么作用?
已经有7人回复
- 标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线
已经有5人回复
- 想问一下关于rt-qPCR的问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】有没有人用Luminex 200 测过mRNA的表达量？
已经有8人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
kikie
木虫 (正式写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 3331.4
- 散金: 100
- 帖子: 417
- 在线: 82.8小时
- 虫号: 513738
- 注册: 2008-02-28
- 专业: 细胞信号转导
2楼2010-06-29 20:50:24
jinling158
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 50.5
- 帖子: 129
- 在线: 54.8小时
- 虫号: 474859
- 注册: 2007-12-06
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2010-06-30 11:23:22
4楼2010-07-07 18:26:06
jinling158
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 50.5
- 帖子: 129
- 在线: 54.8小时
- 虫号: 474859
- 注册: 2007-12-06
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
5楼2010-07-08 11:06:29
