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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】ABI荧光定量PCR Stepone plus 使用说明
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zhangzhuang

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】ABI荧光定量PCR Stepone plus 使用说明 已有3人参与

大家谁做过荧光定量PCR呀？
ABI荧光定量PCR Stepone plus 仪器的操作步骤Sample Text谁知道，
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1楼 2010-06-28 15:47:42
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zhangzhuang

银虫 (初入文坛)
ABI荧光定量PCR Stepone plus 仪器的操作步骤谁知道？
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2楼2010-06-28 15:48:24
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love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还真没有用过
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3楼2010-06-28 16:53:49
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2):热心斑斑。 2010-06-29 08:32:02
引用回帖:
Originally posted by zhangzhuang at 2010-06-28 15:47:42:
大家谁做过荧光定量PCR呀？
ABI荧光定量PCR Stepone plus 仪器的操作步骤Sample Text谁知道，

哈哈，以前，还真是为了给老外讲课，作了一个Stepone plus 操作步骤 ppt，不过现在不知道去那里了，你有什么问题，就直接说就是了，
那里面有三个模式，你可以根据你的实验要求，选择你需要的。



1.  Open the ABI StepOnePlus software on the desktop of the computer that is connected to
the ABI StepOnePlus system.

2.  Select Advanced Setup  

3.  Define: Experiment Properties

a.  Label Your Experiment
i.  Type In Experiment Name
ii.  Type In Barcode, User Name, Comments (Optional)
b.  Select Instrument
i.  StepOnePlus Instrument (96 wells)
c.  Select Experiment Type
i.  Quantitation-Standard Curve
d.  Select Reagents
i.  SYBR Green
e.  Select Ramp Speed
i.  Standard (~2 hours to complete)

4.  Click Plate Setup (on left)
a.  Click Assign Targets and Samples Tab
i.  Highlight the entire plate
ii.  Check the box next to Target 1 under Assign targets to the selected wells
iii.  Verify all wells in Plate Layout view have the “U” symbol (“U” =
unknown)

5.  Click Run Method (This setting should default to run protocol with melting curve.)
a.  Verify Data Capture icon is present at:
i.  Cycling Stage: 60°C (1 minute step)
ii.  Melting Curve Stage: During ramp from 60°C to 95°C
b.  Set Reaction Volume to 25 uL
c.  Verify Number of Cycles is set to 40

6.  Click Start Run

[ Last edited by reasonspare on 2010-6-29 at 04:52 ]
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4楼2010-06-29 04:50:37
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
谢谢，刚开始做，就是不知道怎么操作，
全是英文，怕整不好给弄坏了

你手头上不是有哪个机子，机子后面有个序列号。
你可以到ABI的网站下在一个软件，通过联网，你可以在任何一台电脑上操作 plus one 乐。
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
5楼2010-07-02 05:24:06
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