24小时热门版块排行榜    

查看: 2611  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Dream_鬼鬼

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因工程菌诱导蛋白表达的问题 已有7人参与

目前正在做通过重组大肠杆菌发酵产酶,该酶为胞内酶,主要的发酵过程分为两个阶段,第一阶段,37℃培养产生菌体,培养一定时间后开始进入第二阶段,降温诱导,需要加入诱导剂乳糖。现在有个疑问的就是,我在加入诱导剂的同时在发酵液中补入一定量的一种糖(这种糖为该酶转化时的底物),待诱导结束后测定酶活发现(将诱导阶段加入该酶的底物与不加该酶的底物进行比较):①.在诱导阶段加入该酶底物该酶酶活增加。②.在两种情况下的蛋白质含量差别不大。③.比酶活增加。
    以上现象是否可以认定是蛋白的表达量增加,同时想咨询一下有没有哪位朋友涉及到该方面内容的,或是有看到过有类似现象的文献报道的,希望大家能够给点建议这方面接下来应该怎么去分析。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

看天

木虫 (知名作家)

我觉得不一定是显著增加 酶在有底物时表现出较强的催化活力 没底物时相对来讲就较低 可能是细胞基于经济性的一个调控特性  不知道楼主测酶活的具体手段是什么 应该不会是直接拿发酵液测定吧
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
6楼2010-06-25 22:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

liouwzh

木虫 (正式写手)


看天(金币+1): 2010-06-25 22:13:28
Dream_鬼鬼(金币+1): 2010-06-26 09:50:45
我觉得可以通过PAGE电泳来分析目的蛋白的量是否增加。
2楼2010-06-25 15:31:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dream_鬼鬼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liouwzh at 2010-06-25 15:31:07:
我觉得可以通过PAGE电泳来分析目的蛋白的量是否增加。

蛋白质含量我通过考马斯亮蓝法测过了,我疑惑的是我在诱导阶段加入底物(一种糖可以作为碳源)是否会对诱导酶活产生促进作用。
3楼2010-06-25 15:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dream_鬼鬼

新虫 (小有名气)

有人能回答一下吗?
4楼2010-06-25 19:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 329求调剂 +5 想上学吖吖 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:56 by 23Postgrad
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 10/500 2026-03-19 15:08 by 阳阳哇塞
[考研] 346求调剂[0856] +3 WayneLim327 2026-03-16 6/300 2026-03-19 11:21 by WayneLim327
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸! 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭! 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
信息提示
请填处理意见