24小时热门版块排行榜    

查看: 2570  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Dream_鬼鬼

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因工程菌诱导蛋白表达的问题 已有7人参与

目前正在做通过重组大肠杆菌发酵产酶,该酶为胞内酶,主要的发酵过程分为两个阶段,第一阶段,37℃培养产生菌体,培养一定时间后开始进入第二阶段,降温诱导,需要加入诱导剂乳糖。现在有个疑问的就是,我在加入诱导剂的同时在发酵液中补入一定量的一种糖(这种糖为该酶转化时的底物),待诱导结束后测定酶活发现(将诱导阶段加入该酶的底物与不加该酶的底物进行比较):①.在诱导阶段加入该酶底物该酶酶活增加。②.在两种情况下的蛋白质含量差别不大。③.比酶活增加。
    以上现象是否可以认定是蛋白的表达量增加,同时想咨询一下有没有哪位朋友涉及到该方面内容的,或是有看到过有类似现象的文献报道的,希望大家能够给点建议这方面接下来应该怎么去分析。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dream_鬼鬼

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liouwzh at 2010-06-25 15:31:07:
我觉得可以通过PAGE电泳来分析目的蛋白的量是否增加。

蛋白质含量我通过考马斯亮蓝法测过了,我疑惑的是我在诱导阶段加入底物(一种糖可以作为碳源)是否会对诱导酶活产生促进作用。
3楼2010-06-25 15:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

liouwzh

木虫 (正式写手)


看天(金币+1): 2010-06-25 22:13:28
Dream_鬼鬼(金币+1): 2010-06-26 09:50:45
我觉得可以通过PAGE电泳来分析目的蛋白的量是否增加。
2楼2010-06-25 15:31:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dream_鬼鬼

新虫 (小有名气)

有人能回答一下吗?
4楼2010-06-25 19:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)


Dream_鬼鬼(金币+1): 2010-06-26 09:50:37
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-26 12:11:48
对于糖苷酶来说,有些糖类 对酶活力由促进作用。比如说有些beta-葡萄糖苷酶,在反应体系中加入酶的水解产物会是酶活力提高到原来的2倍以上。
5楼2010-06-25 19:53:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +17 myrtle 2026-03-10 26/1300 2026-03-16 18:32 by 青橙Ln
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 材料与化工专硕调剂 +3 heming3743 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:05 by peike
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 0805,333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 求调剂(材料与化工327) +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见