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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助】C18色谱柱压力大 已有9人参与

用的时间比较久了的才c18柱子,最近用着压力比较大,冲甲醇都能到2000psi,新柱子在900psi左右,反方向冲的话压力就相对比较正常,高人指点下原因。之前处理过几次,用10%的甲醇反向1.0ml流速冲2h,然后正向用压力就正常了,之后再用几次压力又上去了,也用异丙醇反冲过柱子。个人认为柱子里应该没有缓冲盐析出和强保留成分的情况,难道是有脏东西进柱子?那又为什么压力冲下来再用两次又上去了呢?无奈中……
柱子用了接近8个月,基本每天都用,每天使用时间在5小时左右。柱效还可以。
请色谱高人指点,有金币~~
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油鸡花雪

luomuwuhen(金币+2):恩,有道理,不过怎么能把筛板富集的污染物冲掉呢? 2010-06-25 11:06:45
luomuwuhen(金币+1):3Q 2010-06-26 08:27:43
用了8个月这么长时间了压力升高很正常啊,天天使用的话肯定会有强保留成分保留在色谱柱上,而且色谱柱的塞板这么长的时间也可能会有脏东西附着在上面。

很有可能你正向用塞板是造成压力的主要原因,因为污染物会富集到塞板的进口方向,所以你反方向冲压力不会很高,但污染物没有办法冲出来,所以一到正向使用又会升高。
4楼2010-06-25 10:43:22
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aristego

禁虫 (正式写手)

luomuwuhen(金币+1):反冲的次数太多对柱子有损坏?不赞同。柱效可以按照说明书上来做,具体忘了怎么做了。旧柱子和新柱子做样品看峰情况就能大体知道 2010-06-25 11:13:53
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2楼2010-06-25 10:30:30
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forging

金虫 (小有名气)

你用柱子用的太狠了吧
3楼2010-06-25 10:41:06
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xkp123

木虫 (著名写手)

luomuwuhen(金币+1):3Q,那怎么使正向冲压力降低一些呢? 2010-06-25 11:08:47
luomuwuhen(金币+1):3Q 2010-06-26 08:28:01
这个很容易想明白啊,你的样品杂质进入柱子后和硅羟基结合,占据了过多的结合位点,导致柱效降低,同时色谱柱压力升高,你反冲有效果的原因是长期正向使用使得C18链长期向一个方向“倒伏”,反冲后不仅把杂质可以冲出来,而且可以使C18链“竖立”,个人认为这种情况正常,柱子的寿命到了就会这样。
5楼2010-06-25 10:44:53
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