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101wenjing

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】克隆启动子 已有7人参与

各位虫友好,有没有会克隆启动子的?求教中
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢回帖交流~~ 2010-06-18 10:54:08
101wenjing(金币+1): 2010-06-20 09:07:02
这个要看具体情况啊
本物种基因组序列已知的话直接搜出来基因序列,往上游找,然后设计引物P就是了
或者根据近源物种的序列设计引物,还可以加一点简并碱基
如果实在P不出来,就反向或者TAIL
有基因组文库还可以筛库
4楼2010-06-17 14:37:40
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ququr008

金虫 (小有名气)


dhd997:楼主说的对,欢迎交流。 2010-06-16 08:26:38
101wenjing(金币+1): 2010-06-16 18:25:31
lmzxcom1(金币+1):正解 2010-06-17 16:24:55
问题宽泛,你这样的问题还不如自己找实验指南书籍来看!如果试验中遇到什么技术问题,倒是可以问一下
2楼2010-06-16 02:08:24
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fansanjin

新虫 (初入文坛)


lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-06-17 10:35:37
101wenjing(金币+1): 2010-06-20 09:11:45
先在NCBI上找到启动子序列,然后克隆到PGL3的载体中。
3楼2010-06-17 10:23:28
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resurgam

木虫 (著名写手)

引用回帖:
这个要看具体情况啊
本物种基因组序列已知的话直接搜出来基因序列,往上游找,然后设计引物P就是了
或者根据近源物种的序列设计引物,还可以加一点简并碱基
如果实在P不出来,就反向或者TAIL
有基因组文库还可以筛库。

这位说的很全面了
5楼2010-06-17 14:44:11
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