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zzz888

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】配置的胶液不凝固? 已有11人参与

凝胶浓度6%,交联度为5%,配60ml胶液,具体如下:
①30%凝胶溶液(丙烯酰胺 28.5g ,NN亚甲基双丙烯酰胺 1.5g ,加水到100ml) 取10ml;
②1M Tris,0.15M 硼酸缓冲液,pH 8.9,6.3ml;
③亚硫酸钠17mg;
④蒸馏水 43.4ml;
⑤TEMED 25ul
⑥10%(NH4)2S2O3  0.3ml
问题就出在硫代硫酸铵上面, 用过硫酸铵 胶液凝固正常了。谢谢楼下参与讨论的兄弟姐妹们。真心谢谢你们!
这个程序是从国内期刊上面得来的,说实话……国内一小部分文章 唉……


中间存在的问题有

A: Tris-硼酸 缓冲液的PH值不太准确,PH计出问题了,用试纸看的。⊙﹏⊙b汗

B:这个程序是从一篇文章里面得来的,还有一些同样的实验第 ⑥ 是用的 过硫酸铵

两者差别大吗?

TEMED的量我已经加到50了 胶还是不凝固.

求助啊!

[ Last edited by zzz888 on 2010-6-8 at 16:52 ]
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
试剂肯定有问题啊
2楼2010-06-08 08:24:52
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zzz888

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-06-08 08:24:52:
试剂肯定有问题啊

别这么笼统啊 哪个试剂出的问题 PH值吗?
3楼2010-06-08 08:29:25
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
过硫酸铵先用现配。pH影响也比较大。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
4楼2010-06-08 08:38:17
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zzz888

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-06-08 08:38:17:
过硫酸铵先用现配。pH影响也比较大。

现在我是用的 硫代硫酸铵  啊!
5楼2010-06-08 08:46:46
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1214318xy

铁虫 (著名写手)

丙烯酰胺、NN亚甲基双丙烯酰胺没有加错吧?要确定一下的,配好放在55度放一段时间看看
6楼2010-06-08 08:58:11
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330685car

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那些不稳定的试剂都要现配现用
7楼2010-06-08 08:58:17
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
8楼2010-06-08 09:00:51
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


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引用回帖:
Originally posted by zzz888 at 2010-06-08 08:46:46:


现在我是用的 硫代硫酸铵  啊!

不太清楚,那个效果咋样,呵呵
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
9楼2010-06-08 09:24:50
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oceanworld

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
TEMED 换新的会好点
10楼2010-06-08 09:25:25
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