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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】配置的胶液不凝固？
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zzz888

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】配置的胶液不凝固？ 已有11人参与

凝胶浓度6%，交联度为5%，配60ml胶液，具体如下:
①30%凝胶溶液（丙烯酰胺 28.5g ，NN亚甲基双丙烯酰胺 1.5g ，加水到100ml） 取10ml；
②1M Tris，0.15M 硼酸缓冲液，pH 8.9，6.3ml；
③亚硫酸钠17mg；
④蒸馏水 43.4ml；
⑤TEMED 25ul
⑥10%（NH4）2S2O3  0.3ml
问题就出在硫代硫酸铵上面， 用过硫酸铵 胶液凝固正常了。谢谢楼下参与讨论的兄弟姐妹们。真心谢谢你们！
这个程序是从国内期刊上面得来的，说实话……国内一小部分文章 唉……

中间存在的问题有

A： Tris-硼酸 缓冲液的PH值不太准确，PH计出问题了，用试纸看的。⊙﹏⊙b汗

B：这个程序是从一篇文章里面得来的，还有一些同样的实验第 ⑥ 是用的 过硫酸铵

两者差别大吗？

TEMED的量我已经加到50了 胶还是不凝固.

求助啊！

[ Last edited by zzz888 on 2010-6-8 at 16:52 ]
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1楼 2010-06-08 08:12:09
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liyong1981

金虫 (正式写手)
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试剂肯定有问题啊
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2楼2010-06-08 08:24:52
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zzz888

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-06-08 08:24:52:
试剂肯定有问题啊

别这么笼统啊 哪个试剂出的问题 PH值吗？
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3楼2010-06-08 08:29:25
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

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过硫酸铵先用现配。pH影响也比较大。
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4楼2010-06-08 08:38:17
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zzz888

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-06-08 08:38:17:
过硫酸铵先用现配。pH影响也比较大。

现在我是用的 硫代硫酸铵  啊！
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5楼2010-06-08 08:46:46
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1214318xy

铁虫 (著名写手)
丙烯酰胺、NN亚甲基双丙烯酰胺没有加错吧？要确定一下的，配好放在55度放一段时间看看
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6楼2010-06-08 08:58:11
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330685car

木虫 (正式写手)
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那些不稳定的试剂都要现配现用
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7楼2010-06-08 08:58:17
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wuliang318
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8楼2010-06-08 09:00:51
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

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引用回帖:
Originally posted by zzz888 at 2010-06-08 08:46:46:


现在我是用的 硫代硫酸铵  啊！

不太清楚，那个效果咋样，呵呵
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
9楼2010-06-08 09:24:50
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oceanworld

木虫 (小有名气)
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TEMED 换新的会好点
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10楼2010-06-08 09:25:25
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