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dfl204铁杆木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】酵母杂交筛库一般都长多少的克隆
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请教各位虫友： 近期用clontech公司的Y1H Gold系统进行单杂交。诱饵为3X100bp的长度，筛库后3天长出的克隆大概有1000个了。请问是否正常？ 后续的分析应该怎么继续？ PCR-去除短的克隆---提质粒---转大肠杆菌---提质粒---再转化诱饵载体去除假阳性？ 这样的话工作量很大，都有什么好的方法？ 酵母的菌落PCR怎么做最方便？ 我们一般都是先加0.02M NaOH沸水煮过以后用来做模板。 |
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