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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教有关双报告基因检测
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angela1983

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教有关双报告基因检测 已有3人参与

我现在在做一个基因的启动子研究，采用双报告基因检测，但是我发现在我们研究的基因的上游1200bp以内不同长度的几个片段对该基因均有抑制作用且中间一个长度抑制作用明显，其RLU比值分别为：7.7、21.2、5.7、8.5、0.94、15.0、941.7，而没有连接的空质粒对照组的RLU比值为：1798.0。不知道为什么对照组的空质粒反而这么高？请各位大侠赐教
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1楼 2010-05-28 21:34:44
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-29 18:14:41
说实在的 ，pgl2，pgl3都挺好，第一次听说pgl6-ta，查了下，竟然是国产改造的。

功能基因的研究，可不是随便改几个序列就ok的，怀疑这个质粒！

重要的是这个载体在多克隆位点和luc基因之间加入了一段minimal TA promoter

所以啊，对照就成了阳性对照了……
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4楼2010-05-29 10:12:34
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-29 05:25:40
空载体上也应该有启动子吧，说明你的启动子都不如那个启动子的转录活性强吧。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-05-28 23:41:50
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angela1983

银虫 (小有名气)
那是载体选择有问题？我用的载体是PGL6-TA
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3楼2010-05-29 08:19:44
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angela1983

银虫 (小有名气)
那还要换载体重新做吗？
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5楼2010-07-05 20:42:50
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