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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助关于载体多克隆位点改造
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求助关于载体多克隆位点改造 已有5人参与

有一个现成载体，但其上只有极少数位点，想切开后加入如正常载体中的多克隆位点，该怎么做？有哪些因素需要考虑？
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1楼 2010-05-26 18:32:14
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):正解~~~ 2010-05-26 19:45:03
加入的多克隆位点必须是载体唯一的切点，你可以分析一下载体上有哪些切点，插进去的片段大概需要多长，是通过酶切插入还是同源重组插入
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2楼2010-05-26 19:01:55
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
那分析过之后是否需要人工合成相应的片段？
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3楼2010-05-27 11:49:08
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catherine_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xuehu2008 at 2010-05-27 11:49:08:
那分析过之后是否需要人工合成相应的片段？

当然了。。。你提交序列，可以有公司给你合成呀~！~
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4楼2010-05-27 14:21:57
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-29 22:43:08
很简单，插入就行了，注意：骨架不要有重新；读码框别错，OK，
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5楼2010-05-27 14:36:35
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-05-27 14:36:35:
很简单，插入就行了，注意：骨架不要有重新；读码框别错，OK，

“骨架不要有重新”是啥意思？
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6楼2010-05-27 17:14:25
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liyong1981

金虫 (正式写手)
重复～不好意思～
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7楼2010-05-28 09:25:11
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
多谢
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8楼2010-05-29 19:36:06
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-29 21:22:25
最好是添加LIC或者是gateway的位点，不用考虑是否是单一位点，也会提高外源片段的连接效率。但是如果做融合的话要注意是否移码！
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9楼2010-05-29 21:11:38
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