24小时热门版块排行榜    

查看: 1464  |  回复: 13

gsf313

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】奇怪的转化结果,请大家帮分析,谢谢! 已有13人参与

我使用的载体pHANNIBAL(5819bp),EcoR I 和 Xho I分步酶切后,插入一个大约950bp的片段,涂板情况长的不错,挑菌后作PCR,也能扩到条带,但是再摇菌提质粒后,跑胶的带才不到4000,请大家分析下,可能是什么情况?


请注意:EcoR I 和 Xho I之间只差6个碱基
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guotieying

银虫 (正式写手)

污染
可能
本来无一物,何处惹尘埃。
2楼2010-05-17 11:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-17 13:05:09
你用的什么菌?是不是重组了,建议30度摇菌试一下

希望对你有所帮助
3楼2010-05-17 11:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shengwufenzi

金虫 (正式写手)


1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-17 13:05:24
可能EcoR I 和 Xho I酶加多了,出现了星星活性,导致载体pHANNIBAL被乱切了
4楼2010-05-17 11:22:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cqyniu

金虫 (小有名气)


lstt09nk(金币+1):同意~~ 2010-05-17 15:39:28
gsf313(金币+5):谢谢建议 2010-05-25 09:24:18
提质粒后你单酶切了吗?如果直接跑质粒,电泳条带不能确定的。
5楼2010-05-17 11:25:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyb870809

铁杆木虫 (初入文坛)

同意楼上   质粒是不能比较大小的
6楼2010-05-17 12:49:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsf313

铁虫 (小有名气)

没有酶切呢,我现在试试
谢谢大家
7楼2010-05-17 14:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八

我建议你酶切一下再跑,质粒由于超螺旋结构,通常是测不准的
快乐家族
8楼2010-05-17 16:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)

超螺旋的质粒在4k位置正常的啊,酶切再电泳,并测序验证
9楼2010-05-17 16:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)

酶切再pcr验证
10楼2010-05-17 17:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gsf313 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:19 by Demonsssss
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-15 3/150 2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 211本,11408一志愿中科院277分,曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 求调剂! +4 朔朔话 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:38 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院,化学方向,295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 327分求调剂086 +4 西红柿?小帅 2026-03-09 7/350 2026-03-10 14:47 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见