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raulwen2002

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】微生物纤维素酶活测定 已有7人参与

请教各位大侠一个问题,本人目前在做纤维素降解菌对木薯渣的降解效果。使用的菌是从菌种保藏中心购买的高效纤维素降解菌,采用的方法是DNS显色,用分光光度计测定CMC酶活和滤纸酶活时,失活酶的测定值却高于酶酶解反应后的值,请问谁知道可能是什么原因啊?谢谢啦!
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zhangjiewtt

金虫 (小有名气)

★ ★
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-15 00:56:07
纤维素酶是一种多组分酶,包括C1酶、CX酶和β-葡萄糖苷酶三种主要组分。其中C1酶的作用是将天然纤维素水解成无定形纤维素,CX酶的作用是将无定形纤维素继续水解成纤维寡糖,β-葡萄糖苷酶的作用是将纤维寡糖水解成葡萄糖。纤维素酶水解纤维素产生的纤维二糖、葡萄糖等还原糖能将碱性条件下的3,5-二硝基水杨酸(DNS)还原,生成棕红色的氨基化合物,在540nm波长处有最大光吸收,在一定范围内还原糖的量与反应液的颜色强度呈比例关系,利用比色法测定其还原糖生成的量就可测定纤维素酶的活力。
7楼2010-05-14 21:25:53
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫


1949stone(金币+1):谢谢 2010-05-14 13:25:43
你的产物里面含有还原性糖,失活酶的测定值应该是这个原因。
仕不可不弘毅,任重而道远
2楼2010-05-13 15:08:04
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zhjp326

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
1949stone(金币+2):信息交流经验 2010-05-14 13:25:54
测还原糖的方法很多的,找一个灵敏的试试,比如铁氰化钾法,或者其他方法,可能会有用,DNS法灵敏度不够高,不过它操作简单方便,所以大家都用。
3楼2010-05-13 16:50:00
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raulwen2002

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2010-05-13 15:08:04:
你的产物里面含有还原性糖,失活酶的测定值应该是这个原因。

但没有失活的酶液里也有还原性糖啊,因为酶液都是一样的,只是存在失活和不失活的区别,怎么会出现失活酶的吸光度要高于没有失活酶的吸光度呢
4楼2010-05-14 09:47:07
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