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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞消化
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chenqiuju

[交流] 【求助/交流】细胞消化 已有10人参与

我想问一下，我做的是乳腺上皮细胞，我在传代的时候用0.25%胰酶+0.02%EDTA消化大概5分钟，可是我的细胞总也消化不下来，即使用枪头吹也不容易吹下来，这是怎么回事呀？谢谢了！
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1楼 2010-05-12 09:24:48
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yhfs1018

银虫 (小有名气)
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amisking(金币+2):good！ 2010-05-12 11:43:13
我养的是乳腺癌MCF-7，传代的时候是用0.25%胰酶+0.2%EDTA室温消化大概3分钟左右，期间匀速晃动培养瓶，都是能消化下来的。。MDA-MB-231这个方法也是可以的。
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2楼2010-05-12 10:20:44
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chenqiuju

细胞消化

哦，谢谢你。我养的是原代山羊乳腺上皮，我现在还没有细胞系，你们那里有羊的乳腺上皮细胞系么？可以购买点么？
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3楼2010-05-12 10:53:39
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bellams

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amisking(金币+2):滴管好些！ 2010-05-12 11:43:36
我没做过你这种细胞，但是，你可以在培养箱里消化一段时间，应该会比较快，再就是，你可以把已经消化下来的细胞吸出来后，再加入胰酶再消化。最好不要用枪头吹，还是用滴管吧，不然细胞都吹死了。
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4楼2010-05-12 10:54:31
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Rubisco580

金虫 (小有名气)
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楼上正解！
楼主的胰酶有没有问题啊，5分钟都消化不下来？
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5楼2010-05-12 11:04:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
用胰酶冲洗一遍再加胰酶然后放培养箱消化
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6楼2010-05-12 13:05:28
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zhangxiang8760

银虫 (小有名气)
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lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-12 17:32:51
我养过，5分钟消化时间太短，我用0.25的胰酶都要消化8分钟左右，消化的时候可以多用枪吹打促进消化，不然方的时间太久细胞的贴壁性就不好，就会死很多了。其实养乳腺上皮细胞的话还是用胶原酶比较好
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7楼2010-05-12 13:31:18
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chenqiuju

谢谢各位了！我试试你们的方法。
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8楼2010-05-12 13:42:07
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xiongjinjin

铁杆木虫 (著名写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也要做这个细胞，希望有帮助！
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我心永恒！
9楼2010-05-17 16:56:40
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xiongjinjin

铁杆木虫 (著名写手)
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lstt09nk(金币+1):欢迎交流~~ 2010-05-18 18:23:39
我有做过HepG2细胞，也是用0.25%胰酶+0.03%EDTA消化，也是消化不下来，不过你可以试一下，加入胰酶液后，放到37摄氏度的培养箱里消化1~2min，看看效果！
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我心永恒！
10楼2010-05-17 17:00:55
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