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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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chenqiuju

[交流] 【求助/交流】细胞消化 已有10人参与

我想问一下,我做的是乳腺上皮细胞,我在传代的时候用0.25%胰酶+0.02%EDTA消化大概5分钟,可是我的细胞总也消化不下来,即使用枪头吹也不容易吹下来,这是怎么回事呀?谢谢了!
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yhfs1018

银虫 (小有名气)

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amisking(金币+2):good! 2010-05-12 11:43:13
我养的是乳腺癌MCF-7,传代的时候是用0.25%胰酶+0.2%EDTA室温消化大概3分钟左右,期间匀速晃动培养瓶,都是能消化下来的。。MDA-MB-231这个方法也是可以的。
2楼2010-05-12 10:20:44
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chenqiuju

细胞消化

哦,谢谢你。我养的是原代山羊乳腺上皮,我现在还没有细胞系,你们那里有羊的乳腺上皮细胞系么?可以购买点么?
3楼2010-05-12 10:53:39
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bellams

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amisking(金币+2):滴管好些! 2010-05-12 11:43:36
我没做过你这种细胞,但是,你可以在培养箱里消化一段时间,应该会比较快,再就是,你可以把已经消化下来的细胞吸出来后,再加入胰酶再消化。最好不要用枪头吹,还是用滴管吧,不然细胞都吹死了。
4楼2010-05-12 10:54:31
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Rubisco580

金虫 (小有名气)


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楼上正解!
楼主的胰酶有没有问题啊,5分钟都消化不下来?
5楼2010-05-12 11:04:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

用胰酶冲洗一遍再加胰酶然后放培养箱消化
6楼2010-05-12 13:05:28
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zhangxiang8760

银虫 (小有名气)

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lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-12 17:32:51
我养过,5分钟消化时间太短,我用0.25的胰酶都要消化8分钟左右,消化的时候可以多用枪吹打促进消化,不然方的时间太久细胞的贴壁性就不好,就会死很多了。其实养乳腺上皮细胞的话还是用胶原酶比较好
7楼2010-05-12 13:31:18
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chenqiuju

谢谢各位了!我试试你们的方法。
8楼2010-05-12 13:42:07
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xiongjinjin

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也要做这个细胞,希望有帮助!
我心永恒!
9楼2010-05-17 16:56:40
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xiongjinjin

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
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lstt09nk(金币+1):欢迎交流~~ 2010-05-18 18:23:39
我有做过HepG2细胞,也是用0.25%胰酶+0.03%EDTA消化,也是消化不下来,不过你可以试一下,加入胰酶液后,放到37摄氏度的培养箱里消化1~2min,看看效果!
我心永恒!
10楼2010-05-17 17:00:55
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