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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR扩增怎么就没有条带！
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csx2044

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢回帖交流~~ 2010-05-08 17:42:25
主要原因要么是引物设计问题，要么是模板量的问题，建议：1提取的RNA测定浓度、纯度及完整性（从而保证模板没有问题）；2重新设计一对引物，直接在网上设计（普通PCR引物用NCBI；实时定量PCR引物用ROCHE设计）
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我为虫虫，虫虫为我
11楼2010-05-08 17:24:36
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物出问题了
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12楼2010-05-08 20:34:05
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erictan2046

铜虫 (正式写手)

我是楼主，PCR有条带了。

我是楼主，PCR有条带了。
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13楼2010-05-16 10:13:19
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小白兄

金虫 (小有名气)
做什么PCR？大小多少？GC含量怎么样？引物设计匹配度怎么样？关系到退火温度和延伸时间。个人觉得可以尝试梯度退火尝试下。如果再不出来，就要考虑引物的问题，是设计不合理还是引物合成有问题。欢迎继续交流
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时光如流水，匆匆而过。
14楼2010-05-16 12:34:02
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xpb2005

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by caiyifan at 2010-05-08 16:41:28:
你热盖的温度设定好了吗？要105度哦

热盖为什么要105度呢。能不能解释下，100度的话会怎样？
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15楼2010-05-16 18:36:25
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by erictan2046 at 2010-05-16 10:13:19:
我是楼主，PCR有条带了。

想问楼主，查出是什么原因没？
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16楼2010-05-16 18:37:52
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glj123

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by lingn at 2010-05-08 17:14:20
是不是模板中目的基因的量太少了？是拿cDNA P的还是基因组？

请问是CDNA的话，加多少合适？？？
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再不努力就要挨板子了！！！
17楼2013-06-04 20:58:36
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
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18楼2013-06-05 01:07:56
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zhantu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by todouhy at 2010-05-08 14:56:54
再次检查一下自己的引物是否设计合理，各个组分的浓度！

如何检查自己设计的引物的合理性呀？谢谢！
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19楼2013-07-23 15:35:28
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