24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2039  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR扩增怎么就没有条带!已有17人参与

我想请问一下,我最近做PCR反应的时候怎么就没有目的基因片段产物???
是不是以下条件出问题了?

1)退火温度
2)引物浓度
3)模板浓度
4)dNTP浓度
5)Taq PlusI 聚合酶浓度
6)10X PCR buffer.

dNTP、Taq Plus聚合酶、10X PCR buffer 都是新的,剩下第一和第二的因素,
我想请问的是我一直P不出条带出来,是不是引物或者模板的问题??
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erictan2046

铜虫 (正式写手)

我是楼主,PCR有条带了。

我是楼主,PCR有条带了。
13楼2010-05-16 10:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

keeperw

捐助贵宾 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很有可能是引物的原因,最主要两条:3’端特异性要有保证;退火温度要一致
2楼2010-05-08 14:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

todouhy

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
再次检查一下自己的引物是否设计合理,各个组分的浓度!
3楼2010-05-08 14:56:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
p不出来,一般就是引物问题,引物之前如果没有做过,那一般就是引物问题。但是模板也不容忽视,模板质量和浓度也要注意
4楼2010-05-08 15:03:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见