| 查看: 4330 | 回复: 19 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】生物样品的前处理-沉淀蛋白质 已有12人参与
|
|||
|
书上讲的和一篇文献里讲的有些矛盾，但是我又是初学者不敢确定自己理解得对不对，想和虫友们讨论一下。 生物样品进高效前都要经过前处理，在沉淀蛋白质时有一种方法是加入能与水混溶的有机溶剂。 一、书上讲到 “加入甲醇或乙腈后对血浆样品有一定的稀释作用，上清液中药物浓度会比原来低，且由于甲醇或乙腈的存在无法再用三氯甲烷、乙酸乙酯等有机溶剂萃取和浓集，甲醇-水（或乙腈-水）的混合液也很难挥干浓集，因此用甲醇或乙腈沉淀蛋白质直接进行测定的方法有时达不到反相HPLC测定灵敏度要求"。 二、但是我在一篇文献上又看到 '血浆样品为0.5 mL,加于聚丙烯离心管中;加入0·7 mL甲醇,手动振摇1 min; 3 500 r/min离心10 min;取上清液于另一离心管中,以0.5 mol/LNaOH调节pH至9;加入0.5 mL三氯甲烷,手动震摇10 min;然后以3 500 r/min离心10 min;取上清液,用0.5 mL三氯甲烷再提取一次后,小心弃去上清与氯仿层中间的变性蛋白层,合并二次的氯仿层, 40~50℃水浴挥干氯仿;在剩余残渣中加入500μL流动相,震荡使其溶解,过滤后上样。' 文献里用甲醇做变性剂后继续用三氯甲烷来提取 是不是有问题啊 [ Last edited by 小珍珍 on 2010-5-8 at 14:08 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有72人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
-
招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师
已经有3人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有23人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有7人回复
-
filecode
已经有12人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有13人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 硫酸沉淀一定是蛋白质吗？
已经有4人回复
- 求助硫酸铵沉淀蛋白质的问题
已经有12人回复
- 蛋白质表达沉淀如何定量？
已经有8人回复
- 蛋白质冷藏后产生沉淀怎么解决？
已经有9人回复
- 硫酸铵沉淀蛋白质
已经有16人回复
- 【求助/交流】蛋白质等电点沉淀
已经有6人回复
- 【求助/交流】想请教考过研的前辈一个问题:沉淀的蛋白质可溶于酸性或碱性溶液中，对不
已经有4人回复
- 【求助】生物样品的HPLC分析
已经有11人回复
- 【求助/交流】求高效的沉淀浓缩蛋白质的方法
已经有4人回复
- 【求助/交流】血清中蛋白质多少转离心才能使其沉淀?
已经有8人回复
- 【求助】血浆样品做固相萃取前要不要沉淀蛋白？
已经有5人回复
- 【求助/交流】有机溶剂沉淀法处理蛋白质
已经有5人回复
- 【求助】血浆样品的前处理
已经有9人回复
liuzhaomin
金虫 (著名写手)
- PhEPI: 2
- 应助: 252 (大学生)
- 金币: 3285.9
- 散金: 551
- 红花: 39
- 帖子: 1547
- 在线: 504.5小时
- 虫号: 641709
- 注册: 2008-10-31
- 专业: 药物代谢与药物动力学
6楼2010-05-10 10:43:55
hongqianqian
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1558.1
- 红花: 1
- 帖子: 298
- 在线: 36.6小时
- 虫号: 552540
- 注册: 2008-04-29
- 性别: MM
- 专业: 药物代谢与药物动力学
2楼2010-05-08 16:16:13
3楼2010-05-08 20:01:34
billy96406
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 5877.6
- 红花: 1
- 帖子: 160
- 在线: 487.9小时
- 虫号: 261603
- 注册: 2006-06-24
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
4楼2010-05-08 21:30:27
