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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】原核表达载体pGEX-4T-1对应的表达菌株 已有5人参与

做原核表达的过程中,用pGEX-4T-1在BL21(DE3)中没有诱导出目的蛋白,更换Rosetta系列的表达菌株是否与其Ptac的启动子相兼容。Rosetta系列的表达菌株是否提供T7 RNA聚合酶?
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-19 16:10:17:
Rosetta系列的表达菌株可以提供T7 RNA聚合酶,它能表达PET系列载体上的外源基因。。。pGEX系列载体上的外源基因不需要T7 RNA聚合酶,普通的大肠杆菌经IPTG诱导即可表达。。。

pGEX系列载体上的启动子是Ptac,具体来说是什么意思?Trp与Lac操纵子的复合体?

谢谢答案!
5楼2010-07-20 17:15:39
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ivyxiao

金虫 (正式写手)

顶下,同样关注此问题
2楼2010-07-01 17:17:02
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yangjunzju

木虫 (正式写手)


lstt09nk(金币+1):欢迎常来~~ 2010-07-19 17:51:19
dfl204(金币+2): 2010-07-20 17:13:38
Rosetta系列的表达菌株可以提供T7 RNA聚合酶,它能表达PET系列载体上的外源基因。。。pGEX系列载体上的外源基因不需要T7 RNA聚合酶,普通的大肠杆菌经IPTG诱导即可表达。。。
3楼2010-07-19 16:10:17
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

dfl204(金币+3): 2010-07-20 18:13:20
引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-07-20 17:15:39:



pGEX系列载体上的启动子是Ptac,具体来说是什么意思?Trp与Lac操纵子的复合体?

谢谢答案!

Tac启动子是一组由Lac和trp启动子人工构建的杂合启动子,受Lac阻遏蛋白的负调节,它的启动能力比Lac和trp都强。其中Tac 1是由Trp启动子的-35区加上一个合成的46 bp DNA片段(包括Pribnow 盒)和Lac操纵基因构成,Tac 12是由Trp的启动子-35区和Lac启动子的-10区,加上Lac操纵子中的操纵基因部分和SD序列融合而成
6楼2010-07-20 17:49:15
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