24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2116  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】重组质粒PCR的taq酶选择! 已有9人参与

目的片段被T/A克隆进pUCM-T vector中,现把酶切位点EcoRⅠ/BamHⅠ设计进引物中,想把目的片段扩增出来,目的片段大小1.6kb,有文章用Pfu酶PCR,好像Pfu酶的扩增效率很低,能用LA Taq DNA polymerase么?
补充:Pfu酶的PCR产物是否具有A末端,便于后续的T/A克隆????高人指点一二!

[ Last edited by feiye2214 on 2010-5-3 at 22:57 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nnsulei

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
普通的rTaq酶应该就可以的~~
努力做就有结果~
5楼2010-05-03 19:46:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3):good 2010-05-03 17:10
普通Taq酶即可~1.6不算长,到时候挑多几个去测序就完事了
当然,用质粒做模板是非常好扩的~所以用Pfu也无所谓,适当延长延伸时间
2楼2010-05-03 16:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):最近很活跃,谢谢支持生物科学版! 2010-05-04 08:14
用普通的高保真酶就可以了,片段不算长
终于熬成木虫了……
3楼2010-05-03 17:09:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-03 23:01
LA tag的保真性不高,推荐用KOD,我们实验室一直在用,4、5k以内的都没问题,扩增效率也不错
4楼2010-05-03 17:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂325分 +12 15771691647 2026-04-04 13/650 2026-04-06 12:00 by lijunpoly
[考研] 专硕0854初试考材科基,求调剂 +6 3220548044 2026-04-06 9/450 2026-04-06 10:26 by barlinike
[考研] 考研调剂 +5 美丽的youth_ 2026-04-04 6/300 2026-04-06 06:57 by houyaoxu
[考研] 0854电子信息319求调剂(接受跨专业调剂) +3 星星不眨眼喽 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:20 by 啵啵啵0119
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +16 披星河 2026-04-04 16/800 2026-04-05 11:27 by 猪会飞
[考研] 341求调剂 +3 洛多罗 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:36 by 智能智慧
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿华南师范361分,化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +5 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 7/350 2026-04-04 13:23 by 莲菜就是藕吧
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 考研调剂 +8 不爱喝饮料 2026-04-03 8/400 2026-04-03 16:40 by Mistake-J
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦! 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分,求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
[考研] 085900土木水利336分求调剂 +4 Zhangjiangj 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:40 by 1753564080
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 生物与医药考研调剂 +5 铁憨憨123425 2026-03-31 5/250 2026-04-01 18:01 by syh9288
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +7 双马尾痞老板2 2026-03-31 7/350 2026-03-31 19:49 by Dyhoer
信息提示
请填处理意见