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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重组质粒PCR的taq酶选择！
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feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】重组质粒PCR的taq酶选择！ 已有9人参与

目的片段被T/A克隆进pUCM-T vector中，现把酶切位点EcoRⅠ/BamHⅠ设计进引物中，想把目的片段扩增出来，目的片段大小1.6kb，有文章用Pfu酶PCR，好像Pfu酶的扩增效率很低，能用LA Taq DNA polymerase么？
补充：Pfu酶的PCR产物是否具有A末端，便于后续的T/A克隆？？？？高人指点一二！

[ Last edited by feiye2214 on 2010-5-3 at 22:57 ]
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1楼 2010-05-03 16:46:34
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):最近很活跃，谢谢支持生物科学版！ 2010-05-04 08:14
用普通的高保真酶就可以了，片段不算长
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终于熬成木虫了……
3楼2010-05-03 17:09:16
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):分子很奇妙 2010-05-04 08:53
pfu是不加A的，但是前阵子有人发帖子说未加A也把pfu出的片段给TA克隆上了
赞一下(2人) 回复此楼
终于熬成木虫了……
9楼2010-05-04 05:19:40
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