24小时热门版块排行榜    

查看: 1286  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】请教原核表达菌株Rosetta gami(DE3)的生长时间 已有4人参与

各位好,昨天刚刚转了几个质粒到Rosett agami(DE3)菌株中,加上其本身的三种抗性,连同质粒的抗性一共是加了四种抗生素。到现在已经有快18个小时还没有单克隆出现。
请问用过这个菌株的虫友们要多长时间才能长出来?

谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

非常感谢HarveyWang 的经验交流,学习了!
3楼2010-04-27 10:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3): 2010-04-27 12:23
引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-04-27 10:35:51:
各位好,昨天刚刚转了几个质粒到Rosett agami(DE3)菌株中,加上其本身的三种抗性,连同质粒的抗性一共是加了四种抗生素。到现在已经有快18个小时还没有单克隆出现。
请问用过这个菌株的虫友们要多长时间才能长 ...

需要大约24hr,而且也就是大约1mm直径。

大小就是 如以下的句号一样

。  。。   。。   。。。
。   。。 。  。  。              。。。      。

。。   。。     。。  。。。

。。。  。 。 。  。。 。 。

比BL21DE3长的缓慢多了!这主要是Tet 抗性的原因,而不是其他抗生素造成的。据我的经验,Tet对重组蛋白表达许多时候没有好处。
可以考虑不用加Tet 。只利用其密码子偏好的Cam 抗性和你质粒的抗性就行了。

[ Last edited by HarveyWang on 2010-4-27 at 10:42 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2010-04-27 10:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hxwhu

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我曾经做过这个RgD,生长要慢一点,但似乎没有你说的那么慢。你要逐一在使用前活化一两次,记得常用抗生素也只剩下amp可以使用了,merck的这个东西我感觉用处不大。当时我的蛋白,包涵体还是包涵体,没有改观
4楼2010-09-13 12:35:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

450454588

铜虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流, 2010-11-23 09:32:14
我做了数个克隆子感觉虽然慢一点,但会生长起来的!而且效果还行,这个菌真的是要有耐心才能搞好,
学无止境
5楼2010-11-23 08:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学调剂 +6 提神豆沙包 2026-02-28 6/300 2026-03-01 10:49 by sunny81
[考研] 291分工科求调剂 +7 science饿饿 2026-03-01 8/400 2026-03-01 10:43 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[考研] 290求调剂 +6 材料专硕调剂; 2026-02-28 7/350 2026-03-01 09:21 by L135790
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 材料类求调剂 +7 wana_kiko 2026-02-28 7/350 2026-03-01 07:55 by ms629
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见