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dfl204铁杆木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】请教原核表达菌株Rosetta gami（DE3）的生长时间 已有4人参与
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各位好，昨天刚刚转了几个质粒到Rosett agami（DE3）菌株中，加上其本身的三种抗性，连同质粒的抗性一共是加了四种抗生素。到现在已经有快18个小时还没有单克隆出现。 请问用过这个菌株的虫友们要多长时间才能长出来？ 谢谢！ |
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amisking(金币+3): 2010-04-27 12:23
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需要大约24hr，而且也就是大约1mm直径。 大小就是 如以下的句号一样 。 。。 。。 。。。 。 。。 。 。 。 。。。 。 。。 。。 。。 。。。 。。。 。 。 。 。。 。 。 比BL21DE3长的缓慢多了！这主要是Tet 抗性的原因，而不是其他抗生素造成的。据我的经验，Tet对重组蛋白表达许多时候没有好处。 可以考虑不用加Tet 。只利用其密码子偏好的Cam 抗性和你质粒的抗性就行了。 [ Last edited by HarveyWang on 2010-4-27 at 10:42 ] |
2楼2010-04-27 10:40:09
dfl204
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