24小时热门版块排行榜    

查看: 4917  |  回复: 21

wsc0451

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有没有人做过用水煮法提取DNA的啊,望赐教 已有19人参与

本人提细菌DNA基因组,由于对DNA纯度的要求不高,故想通过经济简便的方法提取(之前用试剂盒提,但比较贵),但经过网上找的水煮法流程试验了两次,都没成功(跑电泳都没跑出来),不知道这个方法到底可行不可行。。。

我是这么做的:菌液离心后去掉清液,EP管底部有菌体,加灭菌ddH2O(600微升左右吧),然后沸水浴蒸煮10分钟,再离心,取上清液。。。。理论上DNA就应该溶于水中,但结果。。。悲剧啊。。望赐教~~最近导师催的紧,望各位虫友帮帮忙
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

立意要高,做事要实
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wwllkkhh

金虫 (小有名气)

wsc0451(金币+1): 2010-04-26 22:00
可以的,不过要加氯仿、异戊醇、异丙醇进行洗脱才能得到纯净的DNA
牛~逼~哄~哄
4楼2010-04-26 21:49:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

郑B.CoA

金虫 (正式写手)

话说蛋白质也溶于水吧..
2楼2010-04-26 21:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Science298

铜虫 (正式写手)

wsc0451(金币+1): 2010-04-26 21:59
用5%的氢氧化钠煮
3楼2010-04-26 21:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsc0451

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wwllkkhh at 2010-04-26 21:49:27:
可以的,不过要加氯仿、异戊醇、异丙醇进行洗脱才能得到纯净的DNA

如果不洗脱的话那应该DNA还是有的是吧,只是不纯而已,另外你说的洗脱就是指加试剂然后离心吗?
立意要高,做事要实
5楼2010-04-26 22:02:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馨沁

木虫 (小有名气)

★
1949stone(金币+1): 2010-04-27 08:51
1949stone(金币+1): 2010-04-27 08:51
1949stone(金币+1): 2010-04-27 08:51
1949stone(金币-2):有延迟 只加一个金币 抱歉 2010-04-27 08:53
1949stone(金币-2):有延迟 只加一个金币 抱歉 2010-04-27 08:53
1949stone(金币-2):有延迟 只加一个金币 抱歉 2010-04-27 08:53
lstt09nk(金币+4):网络问题,把金币补加回来,望虫友谅解~~ 2010-04-29 15:49
你的菌是阳性菌还是阴性菌,一般阳性菌水煮效果就不好
6楼2010-04-27 08:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士

这个。。。恩~感觉提DNA也花不了多少钱吧。。。没有必要用水煮,细菌的DNA不是很难提。。。个人认为酚等除蛋白还是必须的~总共试剂也就一百多块钱能用到你毕业
不孝有三,读博为大!
7楼2010-04-27 09:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)

wsc0451(金币+1): 2010-04-28 16:40
水煮法DNA要用电泳跑出来有点困难吧。都是直接pcr
修炼ing,当虫仙……
8楼2010-04-27 15:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaiyf

金虫 (正式写手)

★
wsc0451(金币+4): 2010-04-28 16:41
lstt09nk: 2010-04-29 15:49
lstt09nk(金币+1):热心虫友~~ 2010-04-29 15:50
关于细菌DNA的提取,最好还是用反复煮沸和冻融法最好,单纯的煮沸效果不佳。具体方法是:将菌体收集加无菌水后,先用液氮冷冻(一定要冻实),然后放到沸水浴中煮沸3-5分钟,如此反复三次,再进行离心和后续提取DNA的操作。
我这里有成套的方法,我们实验室已经用得很成熟了,如果你需要可以联系我。
gaiyf@yahoo.cn
多看文献,多学知识
9楼2010-04-27 16:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

用CTAB法呗,也花不了什么钱……一些普通试剂,氯仿异戊醇乙醇
10楼2010-04-27 17:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wsc0451 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:34 by Xc2FxHsHkBNc
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 4/200 2026-11-07 16:50 by Xc2FxHsHkBNc
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 16:06 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 6/300 2026-11-07 15:44 by Xc2FxHsHkBNc
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见