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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酶的分离纯化
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xiaomihai

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】酶的分离纯化 已有4人参与

对于酶的提取，是先用凝胶层析还是先用离胶层析？这两种层析哪一个放在前面分离效果好？谢谢各位前辈指点，呵呵
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1楼 2010-04-21 14:14:03
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
xiaomihai(金币+3): 2010-06-27 09:14:57
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-07-05 16:22:06
我的观点是具体怎么做要看你自己的蛋白。

对于纯化蛋白来说，离子交换层析使用的得当的时候纯化效果会非常不错，特别对于一些碱性蛋白，使用阳离子交换柱纯化的效果会非常好。

凝胶过滤在我个人的观点中它基本没有太大纯化功能，效果不好，所以实际操作中我都是使用它看看蛋白的均一性和换buffer。
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3楼2010-06-24 14:18:59
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ltakashi

银虫 (小有名气)
xiaomihai(金币+2): 2010-06-27 09:14:48
我见大多数文献上面说的是，先用离子交换，再用凝胶
鄙人之见，仅供参考~
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2楼2010-06-24 14:12:20
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huwei0709

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 16:23:31
我正在做酶的分离纯化，是先用葡聚糖的柱子，然后用纤维素的柱子。
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4楼2010-07-05 16:11:47
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evebobo

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果是发酵产生的酶  应该先做盐析曲线 盐析后要透析除盐  之后可上疏水进一步脱盐 跟透析差不多  最好上步G25脱色脱盐加交换缓冲液 然后上离子柱  一般最后走那个superdex 75
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5楼2010-07-05 17:22:32
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