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bihaiqingt金虫 (小有名气)
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【求助/交流】非变性凝胶电泳和变性凝胶电泳 已有5人参与
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| 需要做非变性凝胶电泳分离蛋白，不知道和变性凝胶电泳有什么区别，请教各位！ |
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2楼2010-04-06 19:26:18
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3楼2010-04-06 21:56:45
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5楼2010-04-07 08:34:14
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6楼2010-04-07 15:38:22
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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变性PAGE与非变性PAGE我做过很多，给个E-MAIL我发给你我的大论文，具体有很多关于这个方面的实验。 两个主要区别：1，对上样前的蛋白处理：变性蛋白——顾名思义，上样前，蛋白需要变性（主要方式是加loading buffer在沸水中煮约5min，非变性的蛋白需要有活性，所以尽量保持其在体内的活性或者部分保存，例如凝胶阻滞实验方面就是利用蛋白与特异DNA之间有识别的功能，蛋白与DNA能够结合起来，在胶内跑起来的效果就不一样——注意，这些DNA一般都是用P32标记的，或者现在流行的荧光染色）； 2，胶的配的办法 查阅一本书就可以了，具体名字我忘记了，是影印版本的 3，以及两者应用的区域。 当然一个是变性蛋白一个是非变性的 |
7楼2010-04-07 16:54:06
bihaiqingt
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8楼2010-04-07 18:13:56