应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转化感受态细胞
141/2返回列表12下一页
查看: 1007  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】转化感受态细胞

我的载体9.3k，目的片段1700bp，连接后转化感受态细胞，转了n次还是平板上直接什么都不长，郁闷死了。空载体对照倒是转进去了，还挺多的，多了1.7k就转化不进去吗？望高手帮忙
回复此楼

» 猜你喜欢
砖石王老三！！！
1楼 2010-03-29 22:28:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzuxhq368

金虫 (小有名气)
jack6335(金币+1):谢谢！ 2010-03-29 22:49
恐怕是没连上
回复此楼
2楼2010-03-29 22:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddzhang@

新虫 (小有名气)
jack6335(金币+1):谢谢，感受态没问题，对照能转化出来，我估计也是连接的问题，但就是不知怎么会连不上。 2010-03-30 12:25
感受态  是否完好？   肯定是在连接  这一不  上出了问题。。你再重复连一下，认真分析每一步
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-29 23:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
jack6335(金币+1):呵呵，连了几次了，都不行，你说的是乙醇沉淀纯化一下？ 2010-03-30 12:27
大片段本来就不好连，多试几次，另外，可以考虑醋酸钠沉淀一下再转
赞一下 回复此楼
4楼2010-03-30 08:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)
jack6335(金币+1):我估计也是连接的问题，就是不知怎么处理才能连接上。 2010-03-30 12:28
应该是连接出问题了。首先看一下所用载体与目的基因的酶切位点是否合适，其次看连接酶或连接体系是否有问题。
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-30 08:26:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙中清泉

木虫 (正式写手)
jack6335(金币+1):大肠杆菌，下一步才是酵母。 2010-03-30 12:28
转的是酵母？
回复此楼
6楼2010-03-30 10:04:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Xingqinghai

金虫 (小有名气)
jack6335(金币+1):连接电泳是看不出来的，本来体系就小，还有个效率问题。 2010-03-30 12:29
连接之后最好做一下验证（电泳），证明确实连接上了再转就应该没为题，大一些应该不会有这么大区别。
赞一下 回复此楼
科研啊
7楼2010-03-30 10:11:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by Xingqinghai at 2010-03-30 10:11:19:
连接之后最好做一下验证（电泳），证明确实连接上了再转就应该没为题，大一些应该不会有这么大区别。

电泳是看不到地
回复此楼
8楼2010-03-30 11:38:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hui_student

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
jack6335(金币+1):这主意不错，我怎么就没想到呢，谢谢！ 2010-03-30 15:09
重组质粒可以用你的目的基因引物做PCR，琼脂糖凝胶看看结果，要是连上了，可以扩出结果。我一般都是这样验证连接成功后才做转化。可以试试
赞一下(1人) 回复此楼
一路前行！
9楼2010-03-30 15:06:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1110rainjob

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你这个目的基因是否转的是表达载体，如果是表达载体，有可能由于表达的目的蛋白对细胞有毒害作用等原因造成无法获得阳性克隆
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-03-30 15:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jack6335 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:16 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 洼小桶 2026-03-18 3/150 2026-03-20 22:54 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 319求调剂 +3 小力气珂珂 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:47 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭