24小时热门版块排行榜

返回列表

当前主题已经存档。

bluesky6636

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 277.5
帖子: 18
在线: 6.1小时
虫号: 718131
注册: 2009-03-09
性别: GG
专业: 植物进化生物学

[交流] 【求助/交流】PCR引物求助已有1人参与

我想请大家帮我看看：
我有一条序列，送到生物公司去，以其中的ORF（465bp）设计一对引物，第一次等到的引物对应的产物长度为643bp，大大超出了ORF的长度。
所以，我担心可能是设计有误，故有重新发了一次，结果对应产物长度为543bp。
这让我很搞不懂，我第三次又发了一次当初的序列，第三的结果：对应产物长度为351bp。
所以我现在不明白了，到底这三对引物能否采用，如果采用了应该用那一对引物。
谢谢了~！

回复此楼

» 猜你喜欢

碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有204人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner 已经有0人回复
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗已经有0人回复
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner 已经有0人回复
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松已经有0人回复
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析已经有0人回复
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析已经有0人回复
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析已经有0人回复

1楼 2010-03-28 23:52:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hui_student

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 307.8
帖子: 89
在线: 15.1小时
虫号: 972612
注册: 2010-03-16
性别: GG
专业: 疫苗和佐剂研究/接种/免疫

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

毫无顾虑，这样的引物根本不能用，连目的基因的长度都不能保证，你PCR出来的产物你能用么？
最好自己设计，primer5，挺简单。原核的ORF引物最好设计了，加上酶切位点和保护性碱基就OK。真核的比较复杂了，可以参考论坛里其他高手的见解。
引物设计有很多原则和要求的，既然要做这方面的研究，最好还是自己熟悉下吧！祝好运