应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重组蛋白纯化
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 453  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

gogo926

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重组蛋白纯化

Sample Text

求助各位虫友：

第一次做重组纯化，发现：
1. 蛋白挂不上Ni柱，在透过里；
2. 0-100%线性洗脱50 min（PH=7.4, PBS，500mM咪唑)，45%左右出蛋白峰，但
   咪唑达到500mM时蛋白峰都不下降是怎么回事？

蛋白等电点为10.9，分子量179 kD，用pET28 载体、宿主菌BL21(DE3)表达，C端有his标签

多谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2010-03-22 09:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogo926

银虫 (小有名气)
呜呜，怎么没有大侠回呢
赞一下 回复此楼
2楼2010-03-22 15:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
咪唑本身有紫外吸收
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-22 20:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
缓冲液里面补点NaCl吧，一般0.5M。
另外，咪唑的紫外吸收还挺强的。
赞一下(1人) 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
4楼2010-03-22 20:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogo926

银虫 (小有名气)
洗脱液里有0.5M的氯化钠的
而且这个酶以前做的时候紫外峰会下去的，很纠结啊

[ Last edited by gogo926 on 2010-3-23 at 08:11 ]
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-23 08:05:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gogo926 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学338求调剂！ +5 Zuhui0306 2026-03-26 6/300 2026-03-26 23:42 by 381988266
[考研] 286求调剂 +3 lim0922 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:07 by 不吃魚的貓
[考研] 287求调剂 +6 land xuxu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 23:06 by Dyhoer
[考研] 284求调剂 +9 junqihahaha 2026-03-26 10/500 2026-03-26 22:02 by 不吃魚的貓
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 07化学280分求调剂 +8 722865 2026-03-23 8/400 2026-03-26 20:00 by 不吃魚的貓
[考研] 312求调剂 +8 上岸吧ZJY 2026-03-22 12/600 2026-03-26 18:49 by muchong357
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭