24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 685  |  回复: 9
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 cz2004cz 的 14 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会

cz2004cz

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】质粒电泳的问题请教

我在基因电泳的时候碰到一个问题,希望各位大虾能指点一二呀!
我的基因用荧光染色法测浓度的时候可以检测出明显的超螺旋结构(荧光染料应该是只染超螺旋结构的吧?如果不是超螺旋结构就染不了色,原理应该是没错吧?),但是电泳的时候却跑不开条带。而且条带跑的比loding buffer还快。请问这是为什么呀?


[ Last edited by cz2004cz on 2010-3-18 at 09:50 ]
回复此楼
修和无人见,存心有天知!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

★ ★
cz2004cz(金币+1):谢谢参与
cz2004cz(金币+2): 2010-03-18 10:53
1949stone(金币+1): 2010-03-18 13:27
比buffer快是什么意思,比溴酚蓝快?

如果那样的话就是RNA污染
2楼2010-03-18 10:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cz2004cz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-03-18 10:14:38:
比buffer快是什么意思,比溴酚蓝快?

如果那样的话就是RNA污染

是的,就是比溴酚兰快。
RNA污染?RNA也可以检测出荧光嘛?但是这个基因未经处理的时候,没有这条带呀?基因处理的过程中没有引入RNA的可能。还望赐教!
修和无人见,存心有天知!
3楼2010-03-18 10:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

基因怎么还有超螺旋啊,还以为是质粒呢
4楼2010-03-18 11:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

你是不是 说 是 双螺旋啊

你的意思是sybr green之类的双链荧光吧,
5楼2010-03-18 11:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cz2004cz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-03-18 11:13:59:
你是不是 说 是 双螺旋啊

你的意思是sybr green之类的双链荧光吧,

是的,就是质粒。用hochest33258染色的。关键是没处理之前跑的电泳都是正常的,荧光和电泳对的上;但处理后就只能测出荧光,电泳就对不上了.
修和无人见,存心有天知!
6楼2010-03-18 11:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

还是没看明白,

荧光怎么跟超螺旋扯上关系了,什么叫 跑不开啊
7楼2010-03-18 14:20:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ln0401

新虫 (初入文坛)


cz2004cz(金币+1):谢谢参与
cz2004cz(金币+2): 2010-03-18 16:58
看的不是很明白,质粒电泳检测,一般超螺旋,开环,线性都可以检测出来的,若果有RNA污染,也可以检测出来,通常RNA的迁移速率较快,在溴酚蓝前。
8楼2010-03-18 14:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cz2004cz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-03-18 14:20:21:
还是没看明白,

荧光怎么跟超螺旋扯上关系了,什么叫 跑不开啊

荧光染色是染料和双螺旋结构的沟槽结合,因此只有双螺旋结构能够检测出荧光。
我说的意思是电泳时只在溴酚蓝前面有一条模糊的带,并没有dna的带。
修和无人见,存心有天知!
9楼2010-03-18 16:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cz2004cz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by ln0401 at 2010-03-18 14:39:46:
看的不是很明白,质粒电泳检测,一般超螺旋,开环,线性都可以检测出来的,若果有RNA污染,也可以检测出来,通常RNA的迁移速率较快,在溴酚蓝前。

谢谢!你的意思是这条带应该是rRNA,我明白你的意思。但是奇怪的是我的dna在没经过任何处理的时候电泳时没有这条带,而是很好的两条标准的dna带,但是处理后就只剩下溴酚蓝前面的带了。而处理过程中是没有接触过RNA的。所以还有一种可能是dna降解了,但是专门针对双螺旋结构的荧光检测又可以检测出双螺旋结构。这是我困惑的地方。
还有,多谢你的留言,也解答我的一些疑惑。
修和无人见,存心有天知!
10楼2010-03-18 16:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cz2004cz 的主题更新
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +26 慕绝cc 2026-04-09 30/1500 2026-04-14 18:50 by 蔡苏阳
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 297,工科调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-14 6/300 2026-04-14 16:04 by Art1977
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 一志愿华中农微生物,288分,三年实验经历 +11 代fish 2026-04-09 11/550 2026-04-12 10:21 by Hayaay
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 考研调剂 +26 硕星赴 2026-04-09 27/1350 2026-04-10 22:24 by 猪会飞
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
信息提示
请填处理意见