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bernadat金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助】想知道指纹图谱跟高效液相色谱的最根本区别已有7人参与
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| 要做指纹图谱了,看来看去没发现高效液相色谱跟指纹图谱有什么根本区别,用的检测器可以是一样,只不过指纹图谱跑的时间都很长,都采用了梯度洗脱,尽量要保证所有成分都出来,难道这就是两者的区别???很想知道答案,望过客不吝赐教 |
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6楼2010-05-12 13:04:16
yunmeng6001
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2楼2010-03-13 13:39:40
catjaja
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3楼2010-03-13 14:54:13
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bernadat(金币+3): 2010-03-17 08:51
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诚如2楼所说,指纹图谱有很多种,如果楼主做的是HPLC指纹图谱,那么HPLC指纹图谱用的谱图就是HPLC的谱图,但是指纹图谱跟常规用HPLC检测几个目标物是有区别的。 常规用HPLC做目标物检测,只要目标物能够获得足够的分离度,峰形漂亮,峰面积足够就基本搞定了。但是如果做指纹图谱,不仅要用梯度洗脱、延长洗脱时间等手段保证里面的物质尽量洗脱出来,而且要保证出来的各个峰的峰面积差异不能过大,否则在后续做图谱相似度匹配时,大峰占据的比重过大,对整个样品间相似度评价的贡献过大,这样的指纹图谱就不完美了,不具用该指纹图谱来定性该药物的专属性,因此如果用的是紫外检测器或者是DAD检测器时,除了优化洗脱外,对检测器条件的优化也是非常重要的,具体优化过程可能比目标物检测要复杂得多。 从指纹图谱的概念出发,你的图谱要保证稳定性、模糊性和专属性。 稳定性即同一批药材出来的指纹图谱要能完美重复,相似度匹配率要高。 模糊性即不能只着眼优化单个峰,不能用这少数两三个峰来代表该药材,而是用整张图谱来代表该药材。在保证整个图谱的整体分离度基础上可以牺牲部分个别峰的分离度。从信息论的观点看,如果整张图谱所有峰的分离度总和最大,可以代表着该图谱含有最大化的化学信息,这就足够。 专属性就是这张图谱要有跟其他药物的图谱区别俄地方,不能两个药物做出的图谱的相似度很高,那么这个指纹图谱就代表不了任何药物了。该药物的指纹图谱要具有该药物区别于其他药物的特征,不一定是分离出越多的物质就越好,如果专属性足够,牺牲个别峰的分离度,使分离检测条件相对简化,分析时间相对减少也是可行的,而且简化的条件还能提高图谱的重现性。 |
4楼2010-03-13 18:27:33













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。这样说就是没什么差别啊。