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bernadat

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[交流] 【求助】想知道指纹图谱跟高效液相色谱的最根本区别已有7人参与

要做指纹图谱了，看来看去没发现高效液相色谱跟指纹图谱有什么根本区别，用的检测器可以是一样，只不过指纹图谱跑的时间都很长，都采用了梯度洗脱，尽量要保证所有成分都出来，难道这就是两者的区别？？？很想知道答案，望过客不吝赐教

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1楼2010-03-13 12:32:43

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wakan

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bernadat(金币+3): 2010-03-17 08:51

诚如2楼所说，指纹图谱有很多种，如果楼主做的是HPLC指纹图谱，那么HPLC指纹图谱用的谱图就是HPLC的谱图，但是指纹图谱跟常规用HPLC检测几个目标物是有区别的。
  常规用HPLC做目标物检测，只要目标物能够获得足够的分离度，峰形漂亮，峰面积足够就基本搞定了。但是如果做指纹图谱，不仅要用梯度洗脱、延长洗脱时间等手段保证里面的物质尽量洗脱出来，而且要保证出来的各个峰的峰面积差异不能过大，否则在后续做图谱相似度匹配时，大峰占据的比重过大，对整个样品间相似度评价的贡献过大，这样的指纹图谱就不完美了，不具用该指纹图谱来定性该药物的专属性，因此如果用的是紫外检测器或者是DAD检测器时，除了优化洗脱外，对检测器条件的优化也是非常重要的，具体优化过程可能比目标物检测要复杂得多。
  从指纹图谱的概念出发，你的图谱要保证稳定性、模糊性和专属性。
  稳定性即同一批药材出来的指纹图谱要能完美重复，相似度匹配率要高。
  模糊性即不能只着眼优化单个峰，不能用这少数两三个峰来代表该药材，而是用整张图谱来代表该药材。在保证整个图谱的整体分离度基础上可以牺牲部分个别峰的分离度。从信息论的观点看，如果整张图谱所有峰的分离度总和最大，可以代表着该图谱含有最大化的化学信息，这就足够。
  专属性就是这张图谱要有跟其他药物的图谱区别俄地方，不能两个药物做出的图谱的相似度很高，那么这个指纹图谱就代表不了任何药物了。该药物的指纹图谱要具有该药物区别于其他药物的特征，不一定是分离出越多的物质就越好，如果专属性足够，牺牲个别峰的分离度，使分离检测条件相对简化，分析时间相对减少也是可行的，而且简化的条件还能提高图谱的重现性。