| 查看: 585 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
xiaokuan4185铁虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】请教E.coli中 如何根据OD420的吸光值测beta-半乳糖苷酶的活性
|
||
|
请教：E.coli中如何根据OD420的吸光值测beta-半乳糖苷酶的活性。 E.coli破碎与ONPG的反应，然后测出OD420的吸光值。用哪个公式可以把OD420的吸光值转换成beta-半乳糖苷酶的活性。谢谢高手指点。 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有109人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
j2
木虫 (正式写手)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 3797.8
- 散金: 2
- 红花: 4
- 帖子: 688
- 在线: 108.8小时
- 虫号: 452275
- 注册: 2007-11-05
- 性别: MM
- 专业: 卫生检验
2楼2010-03-14 10:36:55
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-03-14 11:28
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-03-14 11:28
|
（1）首先，你需要其水解产物ONP的微摩尔消光系数。 如果查不到，就用AR级的ONP做标线，求得此值。 注意ONP光吸收曲线受到buffer pH的影响，要用你的反应体系Buffer来溶解， 例如100 mM KH2PO4-NaOH pH6.5. 母液可配置 2000 uM，用Buffer稀释到50-1000 uM，一系列梯度，做线性，可得其微摩尔消光系数，我做的是OD415=0.935/1000 uM. (2)测定样品中的蛋白含量，即X g/L 蛋白。 最好要很准确，这个结果直接影响你酶活计算结果的准确性。 （3）加入不同量的酶在反应体系，计算δA415/min 变化，要知道在多少变化速率内你的不同量的酶跟其速率成正比！ （4）根据酶比活公式计算比活。自己推理吧。 这个要看你的反应体积大小，我的公式不一定适合你的。 |
3楼2010-03-14 11:26:03
