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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒老提不出来
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815kathy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒老提不出来

最近在提质粒，死活也提不出来，每次电泳完紫外下照除了RNA什么也没有，要是加入溶液二剧烈了的话也该有基因组啊，基因组也没有。现在主要有以下几个问题：
1.加入溶液二有时候不变澄清，是怎么回事，与细菌的革兰氏阴阳性有无关系呢？
2.溶液三加入后，出现了沉淀，吸取一点点上清，测PH为酸性，并不是传说中的中性啊，这是怎么回事呢？
3.加入溶液三后大概要冰浴多长时间呢？有说5min的，有说10min的，还有说15min的。。。
希望各位大虾指点迷津。。
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1楼 2010-03-11 23:01:42
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lansha8331

无虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也没准是盒子的问题呢，换一家试试，我用的威格拉斯的去内毒素大提，可以参考一下
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8楼2010-03-18 10:32:19
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冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们做的时候冰浴5min钟，你确保试剂比例合适？如果是就不应该呀！细菌的革兰氏阴阳性可能有关，因为阳性细胞壁太厚，可能破壁不充分吧。
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倚楼听风雨，淡看江湖路！
2楼2010-03-11 23:11:54
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steven689

木虫 (著名写手)
阳性的话 加溶菌酶
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3楼2010-03-12 08:40:22
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815kathy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冬虫夏草1 at 2010-03-11 23:11:54:
我们做的时候冰浴5min钟，你确保试剂比例合适？如果是就不应该呀！细菌的革兰氏阴阳性可能有关，因为阳性细胞壁太厚，可能破壁不充分吧。

恩，试剂比例是100，200，150啊，请问试剂三你是怎么配的啊，按照醋酸钠60ml，冰乙酸11.5ml，水28.5ml，配出来的溶液PH值是5.5左右，可是有的地方又说是4.8，要是再往里面加冰乙酸调的话不就使得溶液体积增大了吗
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4楼2010-03-12 08:43:12
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